[發明專利]一種自南蛇藤根皮中提取雷公藤紅素的方法

有效

• 申請號: 200910144620.1
• 申請日: 2009-08-24
• 公開（公告）號: CN101638425A
• 公開（公告）日: 2010-02-03
• 發明（設計）人: 陳龍勝;許舒雯;呂楊;陳蘭
• 申請（專利權）人: 安徽省科學技術研究院
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司
• 代理人: 吳啟運

一、技術領域

本發明涉及一種自植物中制備天然化學品的方法，具體的說是一種自南蛇藤根皮中提取 雷公藤紅素的方法。

二、背景技術

雷公藤紅素(tripterine)分子式為C₂₉H₃₈O又 名南蛇藤素(Celastrol)，是一種存在于衛矛科植 物雷公藤、南蛇藤等植物中的五環三萜類物質， 其結構式如圖。

以往研究表明，雷公藤紅素能抑制多種癌細 胞的增值，包括白血病、神經膠質瘤、前列腺 癌等。此外，有證據顯示，雷公藤紅素能參與 促炎癥細胞因子、誘導性一氧化氮合酶、黏附 分子、蛋白酶體活性、拓撲異構酶、鉀通道以 及熱休克應答等調控。在體內研究方面，雷公藤紅素能顯著的抑制前列腺癌以及胰腺癌細胞 小鼠腫瘤抑制模型中癌細胞的增值，并且在系統性紅斑狼瘡、哮喘、類風濕性關節炎以及膠 原誘導的關節炎等動物模型中顯示有效的抗炎癥作用。因此，無論在科研還是藥物研發中雷 公藤紅素的需求越來越大。雷公藤紅素在已報道的植物中含量極低，目前多采用常壓反復硅 膠柱層析進行分離，得率低，毒性大，而且有毒溶劑消耗也大。

中國專利20071002543.3公開了南蛇藤莖總萜提取物及其制備方法及用途。特點是從南 蛇藤屬植物南蛇藤莖中提取分離而得到含有南蛇藤莖總二、三萜的提取物。工藝采用95％ 乙醇提取，乙酸乙酯萃取后即得南蛇藤莖總二、三萜，優點在于原料提取率高，成本低，操 作簡便，但是未提及雷公藤紅素的單體制備。

中國專利200710041518.X公開了南蛇藤素的堿金屬鹽化合物及其制備方法。其特點是 一種水溶性南蛇藤素堿金屬鹽化合物及其制備方法，可制成藥學上的各種劑型，包括注射劑， 特別是用于制造注射劑用粉針劑。

中國專利200710039694.X公開了南蛇藤葡甲胺炎及其制備方法。其特點是采用選擇性 的只有南蛇藤分子中羧基參與成鹽的南蛇藤葡甲胺鹽，可制成藥學上的各種劑型。

中國專利200510121360.8公開了一種南蛇藤中成藥及其在抗類風濕關節炎中的應用。 其特點是從衛茅科南蛇藤屬植物南蛇藤中提取分離而得到含有南蛇藤總萜類的提取物，經藥 效學及毒理學實驗證明，該提取物對類風濕關節炎具有較好的治療作用。

美國專利號US4328309公開了用植物細胞培養方法來制備雷公藤甲素、雷公藤紅素等 活性成分。

三、發明內容

本發明旨在提供高純度的雷公藤紅素，所要解決的技術問題是遴選雷公藤紅素含量豐富 的植物源及其提取方法。

研究表明，在植物源南蛇藤中，雷公藤紅素含量最為豐富，且多集中在其根皮部位。所 以本發明的技術方案是以南蛇藤根皮粉為原料，包括提取、分離、純化、重結晶，所述的提 取包括動態回流提取和靜態醇沉萃取，動態回流提取是南蛇藤根皮粉按1∶3～20的質量比 加入低級氯代烷烴加熱回流提取不少于2小時，冷卻、分離、提取液脫溶得到暗紅色浸膏狀 初提物；靜態醇沉萃取是向上述初提物中加入濃度50～70vt％(體積百分比，下同)的甲醇或 乙醇溶液，充分攪拌后靜置萃取，待白色析出物沉淀完全后分離，萃取液脫溶得到紅色稠膏 狀粗提物：所述的純化是將粗提物溶于甲醇中用固定相為正相硅膠或者反相C₁₈或C₈硅膠的 柱色譜分離純化，等度洗脫，收集洗脫液，脫溶、干燥后得到紅色粉末狀精提物，精提物經 重結晶得到純度≥98％紅色結晶狀雷公藤紅素。

所述的低級氯代烷烴選自三氯甲烷(氯仿)或1，2-二氯乙烷(均二氯乙烷)或1，1，1- 三氯乙烷(偏三氯乙烷)等。

所述的正相硅膠柱色譜固定相為200～300目正相硅膠，洗脫液(流動相)為氯仿-甲醇 (體積比70∶30～50∶50)混合液。

所述的反相C₁₈或C₈硅膠柱色譜固定相相為C₁₈或C₈反相硅膠，洗脫液(流動相)為pH值 3～4的75～87vt％乙醇或甲醇溶液。

重結晶所用溶劑為乙醇-水(體積比90∶10～70∶30)混合溶劑。

具體操作如下：