[發(fā)明專利]一種從白樺樹皮中提取分離抗腫瘤有效部位的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910119944.X
• 申請日: 2009-02-27
• 公開（公告）號: CN101485703A
• 公開（公告）日: 2009-07-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李巖;鄭春巍;辛念;邊學(xué)文;李瑋;夏愛華;陳平華
• 申請（專利權(quán)）人: 李巖;陳芝芳;苗壯
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P35/00;A61K129/00
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一、所屬領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種從白樺樹皮中提取分離抗腫瘤有效部位的方法，屬于天然產(chǎn)物化學(xué) 研究領(lǐng)域。

二、技術(shù)背景

白樺樹皮化學(xué)成分復(fù)雜，含三萜類物質(zhì)(包括樺木醇、樺木酸、羽扇豆醇、白樺烯三醇)、 各種高級脂肪酸、氨基酸、糅質(zhì)、酚類物質(zhì)、還原性物質(zhì)、多糖類、各種微量元素等。白樺 樹皮的藥用價值早在明代就有記錄。文獻(xiàn)調(diào)研表明從白樺樹皮中提取的白樺三萜類粗提物對 多種腫瘤有較好的抑制作用，且具有高效低毒的良好效果，尤其是對B16黑色素瘤和S180肉 瘤的抑瘤效果最好。而更多的研究是有關(guān)樺木酸單體的抗腫瘤效果及有機(jī)合成方法，但樺木 酸單體在植物中普遍含量頗低，提取分離或者有機(jī)合成復(fù)雜，成本高，產(chǎn)量低，因而大大限 制其開發(fā)。

三、發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種工藝流程簡單，生產(chǎn)成本低，生產(chǎn)效率高，目標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率高 的白樺樹皮抗腫瘤有效部位的提取分離方法。

本發(fā)明的實現(xiàn)方法如下：

(1)取樺樹皮最粗粉，加入8-14倍量80％或以上濃度的乙醇，加熱回流提取2-4次，每次 30min-60min，合并提取液；

(2)提取液減壓回收乙醇至較難濃縮，合并濃縮液，繼續(xù)于敞口容器中加熱盡可能揮盡乙醇， 加入過程中可加入水調(diào)節(jié)，至較難進(jìn)行，放涼沉淀，加入0.5-5倍量水，進(jìn)一步沉淀，過 濾或者離心取沉淀，即為提取濃縮物；

(3)提取濃縮物用5-50倍量水調(diào)節(jié)混懸后，分別用0.5-5倍量二氯甲烷萃取3-5次，合并萃 取液；

(4)二氯甲烷萃取液用0.2-2倍量1％-10％的NaOH/KOH溶液進(jìn)行沉淀，回收位于 下層二氯甲烷，取混懸有沉淀的上層進(jìn)行離心或者過濾，得沉淀，用水洗去殘余的二氯甲 烷和堿液；

(5)然后用酸處理，充分研碎并攪拌均勻使體系充分反應(yīng)，使最終pH<3，過濾或者離心，水 洗沉淀至近中性，干燥后即得產(chǎn)品，用HPLC法測定干燥產(chǎn)品中樺木酸的含量不低于20％。

四、具體實施方式

1、實施例1：

取白樺樹皮最粗粉200g，用2000ml90％的乙醇回流提取2次，每次1h，合并提取液，減 壓回收乙醇得濃縮液，進(jìn)一步蒸發(fā)乙醇，蒸發(fā)過程中加入適量水調(diào)節(jié)，濃縮液放涼后沉淀大 量析出，加入約等量水進(jìn)一步沉淀，抽濾得提取濃縮物；提取濃縮物用10倍量水調(diào)節(jié)，用1 倍量二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，然后用1/3倍量1％的NaOH溶液進(jìn)行萃取沉淀，回收 二氯甲烷后，取上層混懸有沉淀的水層，3000rpm下離心10min，得到沉淀，水洗殘余二氯甲 烷和堿液，再用約6M鹽酸調(diào)節(jié)酸性至pH＝2左右，水洗沉淀至近中性，80℃烘箱中干燥至恒 重，得到的產(chǎn)品稱重為11.77g，其中樺木三萜酸類含量為60.74％，樺木酸含量為21.78％。

2、實施例2：

本實施例與實施例1所不同的是將NaOH換成KOH，結(jié)果得到產(chǎn)品11.46g，其中樺木三萜 酸類含量為60.68％，樺木酸含量為21.71％。

3、實施例3：

本實施例與實施例1所不同的是將所用樺樹皮最粗粉的量提高到4kg，并分別用40L和50L 的90％乙醇回流兩次，結(jié)果得到產(chǎn)品218.96g，其中樺木三萜酸類含量為60.70％，樺木酸含 量為21.86％。