[發(fā)明專利]miR-155在制備治療胃炎藥物中的應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910104766.3
• 申請(qǐng)日: 2009-09-03
• 公開（公告）號(hào): CN101670118A
• 公開（公告）日: 2010-03-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖斌;鄒全明;劉真;毛旭虎;黎伯勝;唐彬;朱恩東;李娜;郭剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K48/00
• 分類號(hào): A61K48/00;A61P1/04
• 代理公司: 重慶志合專利事務(wù)所
• 代理人: 胡榮琿

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及非編碼小RNA基因miR-155的應(yīng)用，特別涉及miR-155在制備治療胃炎藥物中的應(yīng)用，尤其是miR-155在制備治療由幽門螺桿菌感染引起的胃炎藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

微小RNA(microRNAs，miRNAs)是一類長(zhǎng)度約為20～25nt的內(nèi)源性非編碼RNA分子，普遍存在于真核生物中，它不編碼蛋白質(zhì)或多肽，而是與靶基因的信使RNA(mRNAs)3′非翻譯區(qū)互補(bǔ)結(jié)合，誘導(dǎo)靶mRNA降解或抑制靶mRNA的翻譯，從而實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄后基因調(diào)控作用。許多證據(jù)表明，miRNAs在細(xì)胞增殖、發(fā)育、分化等多種生物學(xué)過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用，且與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。

近年來，miRNAs與免疫系統(tǒng)的關(guān)系越來越受重視，miRNAs已被證實(shí)參與了淋巴細(xì)胞的發(fā)育與分化、抗體的產(chǎn)生及固有性免疫應(yīng)答調(diào)控等過程。在某些病毒感染過程中，病毒可以通過自身合成的或利用宿主的特定miRNAs，調(diào)控病毒或宿主的基因表達(dá)，利于病毒的生存、傳播，或者調(diào)控機(jī)體的抗病毒免疫反應(yīng)。此外，在一些炎癥性疾病中，如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和銀屑病，miRNAs也參與了疾病的發(fā)生與發(fā)展。因此，miRNAs在病原體感染的診斷及相關(guān)炎癥疾病中的治療中可能具有極為廣闊的應(yīng)用前景。

幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori，Hp)是定植于人胃粘膜的重要致病菌，世界人群Hp感染率超過50％。Hp與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤(MALT)和胃癌等多種疾病相關(guān)，對(duì)人類健康構(gòu)成嚴(yán)重危害，世界衛(wèi)生組織(WHO)將其列為一類致癌因子。人體對(duì)于Hp感染的免疫反應(yīng)十分復(fù)雜，雖然機(jī)體對(duì)于Hp感染能夠引發(fā)強(qiáng)烈的細(xì)胞與體液免疫，但是并不能夠有效地清除細(xì)菌，感染狀態(tài)常常持續(xù)存在。因此，Hp感染常常引起慢性胃炎，這也是Hp的重要致病因素之一。臨床治療Hp感染相關(guān)胃炎首先要采用抗生素三聯(lián)或四聯(lián)療法，在一定程度上能清除Hp，但療效不穩(wěn)定，停藥后易復(fù)發(fā)、副反應(yīng)嚴(yán)重，并且耐藥問題目趨嚴(yán)峻。

經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的國內(nèi)外文獻(xiàn)檢索，至今未見有關(guān)miRNAs與Hp感染相關(guān)炎癥的診斷和治療的研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了小分子RNA基因miR-155在制備胃炎藥物中的應(yīng)用，該miR-155能夠有效抑制幽門螺桿菌感染相關(guān)的炎癥反應(yīng)。本發(fā)明所述的miR-155在幽門螺桿菌感染的胃上皮細(xì)胞株和人胃粘膜組織中高表達(dá)，且分別給胃上皮細(xì)胞GES-1轉(zhuǎn)染miR-155模擬體或miR-155抑制劑后，miR-155模擬體能夠顯著減少炎癥因子白細(xì)胞介素8、生長(zhǎng)相關(guān)癌基因α的蛋白分泌水平，表明miR-155能夠有效抑制幽門螺桿菌感染相關(guān)的炎癥反應(yīng)。

本發(fā)明所述的應(yīng)用為治療胃炎的藥物；該治療胃炎的藥物為治療由幽門螺桿菌感染引起的胃炎的藥物。

本發(fā)明提供的miR-155由以下核苷酸組成：5′-UUAAUGCUAAUCGUGAUAGGGGU-3′。

本發(fā)明利用miRNAs微陣列芯片對(duì)幽門螺桿菌感染的胃上皮細(xì)胞株GES-1及未感染的GES-1細(xì)胞的miRNAs的表達(dá)情況進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，Hp感染促進(jìn)了GES-1細(xì)胞中miR-155的表達(dá)，上調(diào)達(dá)2.81倍。進(jìn)一步通過實(shí)時(shí)定量PCR(real-time?PCR)和Northern雜交(Northern?blot)技術(shù)對(duì)miR-155的表達(dá)進(jìn)行分析，結(jié)果與miRNAs微陣列芯片相吻合，Hp感染能夠誘導(dǎo)miR-155的表達(dá)上調(diào)。

其次，本發(fā)明選取了20例Hp陽性的慢性胃炎患者與10例Hp陰性的正常對(duì)照，利用real-time?PCR技術(shù)對(duì)患者胃粘膜組織的miR-155的水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，在Hp感染的慢性胃炎病人的胃粘膜組織中，miR-155的表達(dá)量也要顯著高于Hp陰性的正常胃粘膜組織，這對(duì)于Hp感染的慢性胃炎的臨床診斷和預(yù)后判斷具有重要的參考意義。

同時(shí)，本發(fā)明中分別給胃上皮細(xì)胞GES-1轉(zhuǎn)染miR-155模擬體(miR-155mimics)或miR-155抑制劑(miR-155inhibitors)后，miR-155模擬體能夠顯著減少炎癥因子白細(xì)胞介素8(interleukin-8，IL-8)、生長(zhǎng)相關(guān)癌基因α(growth-related?oncogene-α，GRO-α)的蛋白分泌水平，這表明miR-155能夠有效抑制幽門螺桿菌感染相關(guān)的炎癥反應(yīng)，因此，miR-155在制備治療胃炎藥物方面，特別是在制備治療由幽門螺桿菌感染引起的胃炎藥物方面有廣泛前景。