[發明專利]一種復合菌的制作方法

有效

• 申請號: 200910103085.5
• 申請日: 2009-01-19
• 公開（公告）號: CN101481676A
• 公開（公告）日: 2009-07-15
• 發明（設計）人: 鄧宇;馬詩淳;尹小波;羅輝;劉來雁;張輝;承磊;張云飛;代麗蓉;李強
• 申請（專利權）人: 農業部沼氣科學研究所
• 主分類號: C12N1/22
• 分類號: C12N1/22;C12R1/01;C12R1/02;C12R1/63;C12R1/145
• 代理公司: 重慶志合專利事務所
• 代理人: 趙黎明

1.一種復合菌的制作方法，其步驟為：將產氫產乙酸細菌和產甲烷菌的微生物以及分屬兼性厭氧和嚴格厭氧的發酵性細菌以一定比例混合后接種于含纖維素的培養液中，密封靜置培養，培養溫度為30-50℃，pH為3-10，上述含纖維素的培養液含CaCO₃、3-7‰NaCl，5-10‰纖維素，尿素1-4‰，蛋白胨1-3‰，酵母粉0.5-1.5‰，以水為溶劑，上述由產氫產乙酸細菌和產甲烷菌的微生物以及分屬兼性厭氧和嚴格厭氧的發酵性細菌所組成的菌群由下列菌株組成：

Cytophaga?fermentans發酵噬纖維菌，細胞呈可彎曲桿狀，兼性厭氧，有氧條件下分解纖維素產生乙酸、丙酸、琥珀酸、H₂和CO₂等，同時可產生黃色素，菌株保藏編號ATCC?19072或DSM?9555；

Acetobacterium?woodii伍氏醋酸桿菌，細胞橢圓或短桿，單生、成對偶爾成短鏈，嚴格厭氧，氧化氫、還原CO₂生成乙酸，也發酵果糖和其他底物產生乙酸，菌株保藏編號ATCC?29683或DSM?1030；

Desulfovibrio?vulgaris普通脫硫弧菌，弧狀，以硫酸鹽作為電子受體，還可以代謝碳水化合物、蛋白胨及其代謝中間產物，產生揮發酸，菌株保藏編號ATCC?29579或DSM?644；

Cellulomonas?flavigena產黃纖維單胞菌，細長桿狀，能分解纖維素，還可以利用葡萄糖和其他碳水化合物在好氧和厭氧條件下產酸，菌株保藏編號ATCC?482或DSM?20109；

Butyrivibrio?fibrisolvens溶纖維丁酸弧菌，弧狀，嚴格厭氧，分解纖維素產生有機酸，同時可產生降解半纖維素的半纖維素酶，菌株保藏編號ATCC?19171或DSM?3071；

Clostridium?papyrosolvens溶紙梭菌，直桿，嚴格厭氧，水解纖維素產生乙酸、乙醇和H₂等，菌株保藏編號ATCC?35413或DSM?2782；

Clostridium?cellobioparum產纖維二糖梭菌，彎曲或直桿狀，水解纖維素產生纖維二糖等，菌株保藏編ATCC?15832或DSM?1351；

Clostridium?termitidis彎曲或直桿狀，水解纖維素產生乙酸、乙醇和H₂等，菌株保藏編號ATCC?51846或DSM?5398；

Syntrophomonas?Wolfei沃爾夫伴生單胞菌，輕微螺桿狀，不產芽孢，分解丁酸產生乙酸和H₂，與產甲烷菌互營，菌株保藏編號DSM?4212；

Methanosarcina?barkeri巴氏甲烷八疊球菌不對稱球形，能夠不規則聚集成團，利用甲醇、三甲胺、乙酸和H₂/CO₂生長產甲烷，菌株保藏編號DSM?1538；

Methanobrevibacter?arboriphilicus嗜樹木甲烷短桿菌，短桿菌，單生、成對或成串，只利用H₂/CO₂生長產甲烷，菌株保藏編號ATCC?33747或DSM?1125；

Methanosphaera?stadtmaniae斯氏甲烷球形菌不規則球狀，單生或成對，極端嚴格厭氧，利用H₂/CO₂和甲酸鹽生長產甲烷，要求乙酸等作為有機生長因子，菌株保藏編號DSM?3091；

Methanococcus?vannielii萬氏甲烷球菌，規則或不規則球形，極端嚴格厭氧，利用H₂/CO₂和甲酸鹽生長產甲烷，菌株保藏編號ATCC?35089或DSM?1224。

2.根據權利要求1所述的復合菌的制作方法，其特征在于：所述的分屬兼性厭氧和嚴格厭氧的發酵性細菌、產氫產乙酸細菌和產甲烷菌的各菌株的細胞數占復合菌菌群總細胞數的百分比為：Cytophaga?fermentans占5-10％，Clostridium?papyrosolvens占25-35％，Desulfovibrio?vulgaris占1-3％，Butyrivibrio?fibrisolvens?2.5-5％，Acetobacterium?woodii占5-10％，Cellulomonas?flavigena占1-5％，Clostridium?termitidis占1-5％，Clostridium?cellobioparum占2.5-5％，Syntrophomonas?Wolfei?5-10％，Methanosarcina?barkeri占10-20％，Methanobrevibacter?arboriphilicus占10-15％，Methanosphaera?stadtmaniae?5-8％，Methanococcus?vannielii占2.5-5％。