[發明專利]產β-葡萄糖苷酶的重組菌的構建方法有效
| 申請號: | 200910092527.0 | 申請日: | 2009-09-10 |
| 公開(公告)號: | CN101654680A | 公開(公告)日: | 2010-02-24 |
| 發明(設計)人: | 李榮杰;徐斌;薛培儉;段緒果 | 申請(專利權)人: | 安徽豐原發酵技術工程研究有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/63 | 分類號: | C12N15/63;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/42;C12P19/14;C12P19/12;C12R1/84;C12R1/685;C12R1/66;C12R1/69;C12R1/885;C12R1/645;C12R1/72;C |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 葡萄 糖苷酶 重組 構建 方法 | ||
1.一種產β-葡萄糖苷酶的重組菌的構建方法,其特征在于,從可提供β-葡萄糖苷酶基因的菌體中提取總RNA,利用RT-PCR技術獲得β-葡萄糖苷酶cDNA序列,連接到載體pPIC3.5K上得到重組質粒后轉化宿主,得到產β-葡萄糖苷酶的重組菌。
2.如權利要求1所述的構建方法,其特征在于,所述可提供β-葡萄糖苷酶基因的菌體為黑曲霉(Aspergillus?niger)、海棗曲霉(Aspergillus?phoenicis)、棒曲霉(Aspergillus?clavatus)、米曲霉(Aspergillus?oryzae)、里氏木霉(Thichoderma?reesei)、嗜熱子囊菌(Thermoascus?aurantiacus)、孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)、菌膜假絲酵母(Candida?pelliculosa)、扣囊復膜孢酵母(Saccharomycopsis?fibuligera)、青銅小單胞菌(Micromonosporachalcae)、或農桿菌(Agrobacterium)。
3.如權利要求2所述的構建方法,其特征在于,所述可提供β-葡萄糖苷酶基因的菌體為黑曲霉(Aspergillusniger)。
4.如權利要求3所述的構建方法,其特征在于,所述宿主為畢赤酵母。
5.一種產β-葡萄糖苷酶的重組畢赤酵母,其特征在于,其是由權利要求4所述的構建方法構建得到的。
6.權利要求5所述的重組畢赤酵母菌株在發酵生產β-葡萄糖苷酶中的應用。
7.權利要求5所述的重組畢赤酵母菌株在催化葡萄糖生產槐糖中的應用。
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