[發明專利]一種百合種球病毒的脫除方法

有效

• 申請號: 200910091972.5
• 申請日: 2009-09-02
• 公開（公告）號: CN101658135A
• 公開（公告）日: 2010-03-03
• 發明（設計）人: 呂英民;鄭麗娜;程堂仁;張強英;張啟翔
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司
• 代理人: 王朋飛

技術領域

本發明涉及一種百合種球病毒的脫除方法，特別涉及一種采用熱處理脫毒、化學藥劑脫毒以及熱處理脫毒和化學藥劑脫毒綜合應用的方法。

背景技術

席夢利等(席夢利，王節萍，章靜娟等.宜興百合脫毒技術[J].江蘇農業學報，2001，17(1)：49～51.28)以宜興百合為試材，對3種脫毒方法(莖尖培養、熱處理結合莖尖培養、花藥培養)進行研究，結果表明，珠芽經50℃熱水處理40min，培養30d后，切取0.8～1.0mm莖尖培養的脫毒效果最好，成活率為15％，脫毒率達100％，熱水處理50min的珠芽全部受熱死亡，熱空氣處理42d后，切取長度0.8～1.0mm的莖尖培養，脫毒率可達40％。

郭方其等(郭方其，丁曉瑜，朱金慶，黎俠，林森洪.東方百合熱處理莖尖培養及組培快繁技術研究.中國球根花卉年報，2006，101～106.)研究了“西伯利亞”的熱處理莖尖培養，結果表明，鱗莖在50℃下處理80min，在MS培養基上添加0.1～0.3g/L活性炭可提高莖尖分化率，試管鱗莖經30～38℃交替變溫熱處理脫毒60天，鱗莖成活率和莖尖分化率較高。

張藝萍等(張藝萍，屈云慧，王祥寧，吳學尉，熊麗.提高百合莖尖組織培養脫毒效率研究.廣東農業科學，2007(1)，37～38.)以帶有CMV病毒的東方百合栽培品種“西伯利亞”鱗莖為外植體，常規消毒后培養成苗，熱處理后剝取較大的莖尖(0.4～0.6mm)進行培養，待莖尖長成植株后再次剝取較大莖尖進行二次脫毒，經檢測脫毒率可達80％，提高了百合莖尖組織培養脫毒效率。

陳穎(陳穎，王亞斌，羅鳳霞.索拉亞百合莖尖組織培養研究[J].遼寧農業科學，2005(2)：6-8.)以索拉亞百合的莖尖為外植體，成功建立了快速無性繁殖體系。莖尖愈傷組織誘導培養基為MS+BA3mg/L+NAA3mg/L，芽繼代增殖的最佳培養基MS+BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L，KT對芽的增殖效果不如BA，IBA的效果明顯好于IAA，IBA的使用濃度以0.05mg/L左右為宜。

Kim等(Kim?JY，Lee?SY，Choi?JK，等.病毒唑對百合植株LSV和CMV病毒脫除的影響.RDA農業科學雜志(韓國出版)，1994，36：370～374.)研究報道了病毒唑對CMV有較強的抑制作用。(Blom-Barnhoorn(1985)Blom-Barnhoorn，G.J.和J.V.Aartrijk.1985.The?regeneration?of?plants?free?of?LSV?and?TBV?from?infected?liliumbulb-scale?explants?in?the?presence?of?virazole.Acta?Hort.164：163-168)采用不同的病毒唑濃度(20和100mg/L)，分別獲得了兩個百合品種“Georgia”和“Connecticut?King”的無毒苗。

Xu-PinSan(1999)在鱗片誘導培養基中加5mg/L的硫尿嘧啶，獲得80％脫毒植株。(Xu?P?S，Niimi?Y，1999.Evaluation?of?virus_free?bulbletsproduction?by?antiviral?and/or?heat?treatment?inin?vitroscale?cultures?ofLilium?longiflorum?Georgia?andL.×.Casablanca.JJapan?SocHort?Sci，68：640～647植物學通報20卷)。

徐品三(徐品三，欒雨時，劉紀文，新美芳二.百合不定芽培養脫毒種球生產的研究.植物學通報.2003，20(3)：313～318.)用10mg/LDHT發現，對植株生長無任何影響，進一步證明了抗病毒劑的種類和濃度對植物的生長阻害作用是不同的。

席夢利(席夢利，王節萍，章靜娟等.宜興百合脫毒技術[J].江蘇農業學報，2001，17(1)：49～51.28)利用38±1℃，6h或25℃8h熱空氣和50±1℃，40min恒溫水浴結合莖尖培養脫除了宜興百合的CMV病毒。