[發(fā)明專利]一種百合種球病毒的脫除方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910091972.5 | 申請日: | 2009-09-02 |
| 公開(公告)號: | CN101658135A | 公開(公告)日: | 2010-03-03 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 呂英民;鄭麗娜;程堂仁;張強(qiáng)英;張啟翔 | 申請(專利權(quán))人: | 北京林業(yè)大學(xué) |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人: | 王朋飛 |
| 地址: | 100083*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 百合 病毒 脫除 方法 | ||
1.一種百合種球病毒的脫除方法,其特征在于,采用暗培養(yǎng),對無性繁殖系的組培苗兩次剝?nèi)∏o尖進(jìn)行消毒并脫毒,莖尖的脫毒方式為莖尖熱處理結(jié)合化學(xué)藥劑脫毒:變溫處理種球球芯3~5周,溫度范圍為25~38℃,同時(shí)用病毒唑脫毒,濃度為5~7mg/ml,莖尖大小為0.4~1.2mm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的百合種球病毒的脫除方法,其特征在于,所述脫毒方法為莖尖熱處理結(jié)合化學(xué)藥劑脫毒:變溫處理種球球芯4周,溫度范圍為25~38℃,同時(shí)用病毒唑脫毒,濃度為6mg/ml,莖尖大小為0.4~1.2mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述百合種球病毒的脫除方法,其特征在于一次莖尖培養(yǎng)及消毒的步驟包括:1)取經(jīng)4℃處理的抽芽,芽長4~8cm的鱗莖,從莖節(jié)處切下,剝除全部外部鱗片,僅留長度2~3cm的球芯;2)用中性洗滌劑洗凈后,在流水中沖洗30min,用蒸餾水洗滌3次,每次1min,投入0.1%升汞中消毒5min,然后用無菌水沖洗5次,每次3min;3)用滅菌濾紙吸干表面水分,為下一步脫毒做準(zhǔn)備。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述百合種球病毒的脫除方法,其特征在于二次莖尖培養(yǎng)及消毒的步驟包括:1)將經(jīng)過消毒并脫毒后的一次莖尖鱗片培養(yǎng)39~41d,開始出現(xiàn)膨脹,形成愈傷組織,轉(zhuǎn)接到MS+6-BA?1.0mg/L+NAA?0.2mg/L培養(yǎng)基中,于室溫24~26℃下進(jìn)行暗培養(yǎng);2)培養(yǎng)29~31d,從愈傷組織上分化出不定芽,形成無根苗,剝?nèi)o根苗的莖尖即新生芽頂端白、亮的生長點(diǎn)進(jìn)行消毒;3)消毒方式為2%次氯酸鈉15分鐘,處理三次,每次5分鐘;4)用滅菌濾紙吸干表面水分,為下一步脫毒做準(zhǔn)備。
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