[發明專利]羊種布魯氏菌免疫標記重組菌株與其在制備疫苗中的應用

無效

• 申請號: 200910090475.3
• 申請日: 2009-08-12
• 公開（公告）號: CN101629152A
• 公開（公告）日: 2010-01-20
• 發明（設計）人: 吳清民;牛建蕊;劉文娟;任婕;劉文曉;楊羽;林懷櫻
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K39/10;A61P31/04;C12R1/01
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關 暢

1、羊種布魯氏菌免疫標記重組菌株，是將羊種布魯氏菌(Brucella?melitensis)中的磷酸葡萄糖變位酶滅活得到的菌株。

2、如權利要求1所述的重組菌，其特征在于：所述磷酸葡萄糖變位酶是由序列表中的序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質。

3、如權利要求1或2所述的重組菌，其特征在于：所述滅活是通過同源重組實現的。

4、如權利要求3所述的重組菌，其特征在于：所述同源重組是將DNA片段DM2導入所述羊種布魯氏菌實現的；所述DNA片段DM2自上游至下游依次為同源臂DM2-1和同源臂DM2-2；所述同源臂DM2-1和同源臂DM2-2能與所述磷酸葡萄糖變位酶編碼基因的上游和下游序列發生同源重組，滅活所述磷酸葡萄糖變位酶基因。

5、如權利要求4所述的重組菌，其特征在于：所述同源臂DM2-1和同源臂DM2-2的長度均為400-600bp。

6、如權利要求5所述的重組菌，其特征在于：所述同源臂DM2-1是以羊布魯氏菌標準菌株16M的基因組為模板，以核苷酸序列分別為序列表中序列3和序列表中序列4的引物對擴增得到的；所述同源臂DM2-2是以羊布魯氏菌標準菌株16M的基因組為模板，以核苷酸序列分別為序列表中序列5和序列表中序列6的引物對擴增得到的。

7、如權利要求1-6中任意一項所述的重組菌，其特征在于：所述羊種布魯氏菌為布魯氏菌標準菌株16M。

8、權利要求1至7中任一所述重組菌在制備羊種布魯氏菌免疫標記重組菌株中的應用。

9、一種羊種布魯氏菌免疫標記重組菌株疫苗，其活性成為權利要求1至7中任一所述的羊種布魯氏菌免疫標記重組菌株。