[發明專利]納米殼聚糖衍生物及制備方法和它的應用

無效

• 申請號: 200910086838.6
• 申請日: 2009-06-08
• 公開（公告）號: CN101575384A
• 公開（公告）日: 2009-11-11
• 發明（設計）人: 鄒霞娟;婁雅欣;鐘麗君;劉丹;楊彬;彭嘉柔
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08;C07K1/22
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司
• 代理人: 史雙元

1.納米殼聚糖衍生物，其特征在于，所述殼聚糖衍生物是殼聚糖與C₃-C₈直鏈或支鏈烯酸環氧丙酯發生自聚接枝反應的產物，再與氨基取代苯硼酸進行開環加成反應得到的，所述殼聚糖衍生物帶有活性硼酸基官能團，顆粒大小為1-300nm。

2.根據權利要求1所述的納米殼聚糖衍生物，其特征在于，所述氨基取代苯硼酸為3-氨基苯硼酸、2-氨基苯硼酸或4-氨基苯硼酸。

3.根據權利要求1所述的納米殼聚糖衍生物，其特征在于，所述烯酸環氧丙酯為甲基丙烯酸環氧丙酯或丙烯酸環氧丙酯。

4.權利要求1所述的納米殼聚糖衍生物的制備方法，其特征在于，包括下列步驟：

(1)將殼聚糖溶于含有0.1-20wt％酸的水溶液，再與甲基丙烯酸環氧丙酯或丙烯酸環氧丙酯混合，加入引發劑后進行自聚接枝反應，在反應體系中，殼聚糖的含量為1.5-2.5wt％，甲基丙烯酸環氧丙酯或丙烯酸環氧丙酯的含量為2-10wt％，反應溫度為40-100℃，反應時間為0.5-4小時，得到中間體；

(2)將步驟1得到的中間體與氨基取代苯硼酸置于氯化鈉和碳酸鈉的水溶液中進行開環加成反應，其中，氨基取代苯硼酸的用量是中間體的1-5倍，且占反應體系的2-10wt％，反應溫度為50-80℃，pH值為8-12，反應時間4-6小時，降至室溫后，過濾，用水洗滌至中性，得到目標產物。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述引發劑為偶氮二異丁腈，正丁基鋰，過硫酸鉀，硝酸鈰銨，硫代碳酸-溴酸鉀，二高碘酸銅酸鉀，過硫酸氨或硫代硫酸鈉中的一種或多種，其中，加入量為反應體系的1-5wt％。

6.根據權利要求5所述的納米殼聚糖衍生物的制備方法，其特征在于，所述酸為甲酸或乙酸。

7.納米殼聚糖衍生物在富集和純化糖基化多肽/蛋白方面的應用，其特征在于，將酶解后的待分析物溶于上樣液中，將其加入到權利要求1所述的納米殼聚糖衍生物納米材料中進行富集，用上樣液將富集糖基化多肽的殼聚糖衍生物洗滌2-5次后再用水快速洗滌1-2次，得到的納米殼聚糖衍生物，可直接用于MALDI-TOF-MS質譜分析或以洗脫溶液洗脫負載的糖基化多肽/蛋白。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述上樣液為含有50mM羥乙基哌嗪乙硫磺酸的0.5M氯化鈉水溶液或50mM碳酸氫氨水溶液。

9.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述洗脫溶液為含有50％乙腈和2％三氟乙酸的水溶液。