[發(fā)明專利]一步純化固定化γ-內(nèi)酰胺酶及拆分(±)γ-內(nèi)酰胺的方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200910084258.3 | 申請(qǐng)日： | 2009-05-15 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN101544972A | 公開(kāi)（公告）日： | 2009-09-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 鄭國(guó)鈞;林建東;王建軍;張星;曹燕萍 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 北京化工大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N11/10 | 分類號(hào)： | C12N11/10;C12N11/04;C12P13/02 |
| 代理公司： | 北京思海天達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人： | 劉 萍 |
| 地址： | 100029北*** | 國(guó)省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一步 純化 固定 內(nèi)酰胺 拆分 方法 | ||
【權(quán)利要求書(shū)】：
1、一步純化固定化γ-內(nèi)酰胺酶及拆分(±)γ-內(nèi)酰胺的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)γ-內(nèi)酰胺水解酶的固定化：其特征是將N端與C端均帶組氨酸標(biāo)記的γ-內(nèi)酰胺水解酶的基因工程菌或N端與C端僅一端帶組氨酸標(biāo)記的γ-內(nèi)酰胺水解酶的基因工程菌，用上樣緩沖液懸浮，然后采用超聲破碎，破碎上清液流過(guò)Ni-NTA瓊脂糖或Ni-NTA葡聚糖填料的親和柱，將固定上該酶的親和柱用水保存，待用；
(2)(±)γ-內(nèi)酰胺的拆分：其特征是將固定上該酶的親和柱置于30～100℃的水浴中，在該酶最適pH值5～10下，將2～20g·L-1的底物(±)γ-內(nèi)酰胺連續(xù)流過(guò)的親和柱，連續(xù)轉(zhuǎn)化。
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