[發明專利]一種懸浮培養BHK21細胞生產狂犬病病毒的方法

有效

• 申請號: 200910081044.0
• 申請日: 2009-03-31
• 公開（公告）號: CN101851608A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 陳文慶;王建超;劉俊生
• 申請（專利權）人: 北京清大天一科技有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12R1/93
• 代理公司: 北京銀龍知識產權代理有限公司 11243
• 代理人: 鐘晶

1.一種懸浮培養BHK21細胞生產狂犬病病毒的方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

1)在裝有BHK21細胞培養基的生物反應器中懸浮培養BHK21細胞；

其中，所述步驟1)懸浮培養的條件包括：32-36℃的溫度、7.0-7.8的pH值和30-50％的溶氧濃度；所述BHK21細胞培養基包括分散劑和下表1所示的組分。

表1

??組分??mg/L分散劑??組分??mg/L分散劑??L-丙氨酸??80-120??四水合硝酸鈣??30-80??L-精氨酸鹽酸鹽??180-210??氯化鉀??350-500??L-天門冬氨酸??5-30??無水硫酸鎂??50-80??L-天門冬酰胺??30-60??氯化鈉??6000-8000??L-半胱氨酸鹽酸鹽??10-30??無水磷酸氫二鈉??200-400??L-谷氨酸??200-250??七水硫酸亞鐵??0.1-1??L-谷氨酰胺??300-500??七水合硫酸鋅??0.2-3??L-組氨酸鹽酸鹽??20-50??D-葡萄糖??1000-3000??L-羥脯氨酸??5-15??谷胱甘肽??0.2-2??L-異亮氨酸??100-150??丙酮酸鈉??20-120??L-亮氨酸??20-50??抗壞血酸??1-10??L-賴氨酸鹽酸鹽??100-200??氯化膽堿??5-25??L-蛋氨酸??10-50??D-泛酸鈣??1-10??L-苯丙氨酸??10-50??葉酸??2-10??L-脯氨酸??20-60??煙酰胺??1-5??L-絲氨酸??20-60??鹽酸吡哆醇??1-10??L-蘇氨酸??60-100??核黃素??0.2-2??L-色氨酸??10-50??鹽酸硫胺??1-10

??組分??mg/L分散劑??組分??mg/L分散劑??L-纈氨酸??30-70??維生素B12??1-10??L-酪氨酸??30-80??六水合氯化鎂??40-100??甘氨酸??30-80??次黃嘌呤??1-10??L-胱氨酸鹽酸鹽??30-80??胸苷??0.1-2??無水氯化鈣??30-80??無水磷酸二氫鉀??20-100??無水磷酸二氫鈉??30-80??大豆蛋白??100-200??HEPES??300-400

所述分散劑選自蒸餾水、去離子水、注射用水、重蒸水、超純水中的一種或幾種。