[發明專利]人工合成豬生長激素基因及其表達純化方法無效
| 申請號： | 200910075520.8 | 申請日： | 2009-09-21 |
| 公開（公告）號： | CN101665788A | 公開（公告）日： | 2010-03-10 |
| 發明（設計）人： | 柴寶峰;梁愛華;張振興;王偉;付月君;申泉;張志云 | 申請（專利權）人： | 山西大學 |
| 主分類號： | C12N15/18 | 分類號： | C12N15/18;C12N15/70;C12P21/02;C07K14/61;C07K1/14;C12R1/19 |
| 代理公司： | 山西五維專利事務所（有限公司） | 代理人： | 楊耀田 |
| 地址： | 030006山*** | 國省代碼： | 山西;14 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 人工合成 生長激素 基因 及其 表達 純化 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種人工合成的豬生長激素PGH基因，其特征在于，它是序列表中SEQ?ID?NO1的 核苷酸序列。
2.如權利要求1所述的人工合成的豬生長激素基因的表達純化方法，其特征在于，包 括如下步驟：
(1)構建含有人工合成的PGH基因的重組質粒pET-28a+-PGH；
(2)將重組質粒pET-28a+-PGH轉化至宿主細胞BL21(DE3)中，得到含有重組質粒的工程 菌株；
(3)將工程菌株接種到LB培養基溶液中培養，當工程菌培養液濃度OD600達到0.6-0.8時， 加入0.5mmol/L?IPTG，37℃誘導表達6小時，得到高效表達的PGH包涵體；離心，棄上清， 清洗包涵體；
(4)逐滴加入pH為12的含有2mol/L尿素的100mmol/L?Tris緩沖液，溶解PGH包涵體；
(5)按0.1mL/min逐滴緩慢加入pH8.5，含有50mmol/L?Tris、sucrose?5％、2mol/L?Urea的 復性緩沖液，4℃溫育2小時，13000rpm，4℃離心30min，取上清，得到可溶性的PGH；
(6)用superdex-75凝膠層析的方法去除可溶性PGH中的尿素，得到目的蛋白PGH。
下載完整專利技術內容需要扣除積分，VIP會員可以免費下載。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于山西大學，未經山西大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/200910075520.8/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
