[發明專利]人干擾素α-2b與人胸腺素α1的融合蛋白及其制備

無效

• 申請號: 200910071380.7
• 申請日: 2009-02-05
• 公開（公告）號: CN101798350A
• 公開（公告）日: 2010-08-11
• 發明（設計）人: 李會成;李鄭武;朱紅杰;冷國慶;陳玉軍;劉艷;趙華南;高晶;王晴
• 申請（專利權）人: 哈藥集團生物工程有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C07K1/18
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1.一種融合蛋白，其特征在于：具有人干擾素α-2b功能的多肽和具有入胸腺素α1功能的多肽融合，其連接方式為：T?α1-M-IFN?α-2b-T?α1、IFNα-2b-Tα1。其中，T?α1代表人胸腺素α1，IFN?α-2b代表人干擾素α-2b，M代表連接肽。

2.權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：融合蛋白T?α1-M-IFN?α-2b-T?α1，在T?α1與IFN?α-2b之間加上了一段連接肽，該連接肽的形式為0-8個氨基酸，最優化的形式是4-5個氨基酸。

3.權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：融合蛋白IFN?α-2b-T?α1，在IFNα-2b和T?α1之間不存在連接肽，并不影響該蛋白的表達及活性。

4.權利要求2所述融合蛋白的DNA，其特征在于：其氨基酸密碼子可以是其簡并密碼子的任意一個。

5.權利要求3所述融合蛋白的DNA，其特征在于：其氨基酸密碼子可以是其簡并密碼子的任意一個。

6.一種表達載體，其特征在于：它含有權利要求4和權利要求5所述DNA中的一種。

7.權利要求6所述表達載體，是真核細胞表達載體和原核細胞表達載體，優選PET系列載體。

8.一種宿主細胞，其特征在于：它含有權利要求9的載體。

9.權利要求8所述宿主細胞，是動物細胞、酵母、大腸桿菌，優選大腸桿菌。

10.一種融合蛋白的純化方法，其特征是包含以下的步驟：在PH4.5的條件下，使用醋酸-醋酸鈉緩沖液，利用陽離子層析介質在低濃度氯化鈉條件下上樣，高濃度氯化鈉條件下洗脫純化；然后在PH8.2的條件下，使用Tris-HCl緩沖液，利用陰離子層析介質進一步純化，獲得純度95％以上樣品。