[發明專利]原位轉化-吸附分離技術聯用制備漢防己總生物堿的方法

無效

• 申請號: 200910069612.5
• 申請日: 2009-07-06
• 公開（公告）號: CN101606976A
• 公開（公告）日: 2009-12-23
• 發明（設計）人: 王春紅;施榮富;麻寧;夏建軍
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: A61K36/59
• 分類號: A61K36/59;A61P35/00;A61P11/00;A61P9/12;A61P1/16;A61P9/10;A61P27/02;A61P29/00;A61K125/00
• 代理公司: 天津佳盟知識產權代理有限公司
• 代理人: 顏濟奎

【技術領域】：

本發明涉及中藥有效成分的提取和分離技術領域，特別是原位轉化-吸附分離技術聯用制備漢防己總生物堿的方法。

【背景技術】：

漢防己為防己科千金藤屬植物粉防己Stephania?tetrandra?S.Moore的根，在我國有悠久的臨床用藥歷史，其中主要的活性成分為生物堿，如漢防己堿(又稱漢防己甲素，tetrandrine)、防己諾林堿(又稱漢防己乙素，demethyltetrandrine)、甲基粉防己堿、二小檗胺、輪環藤酚堿等。其中，漢防己甲素和漢防己乙素含量最高，也是漢防己中主要的藥效成分。

千金藤屬植物在我國民間早有抗癌的說法。其中漢防己甲素具有對肝纖維化的防治作用，此外，還對高血壓、心絞痛、眼科疾病等具有很明顯的治療作用(戈升榮，崔嵐，王平全，漢防己甲素藥理作用的研究進展，中草藥，31(8)：附4～附6,2000)。同時，漢防己甲素是臨床治療矽肺病的首選藥物。此外，漢防己總生物堿具有很好的鎮痛效果，有研究認為漢防己總堿的鎮痛效力是嗎啡的13％，且有消炎、抗過敏及松弛肌肉等作用，可用于癌癥放化療后的輔助鎮痛藥，也可用作治療戒毒過程中的頭痛、腹痛、四肢關節痛、周身疼痛等癥狀(胡皓，漢防己治療毒品戒斷中諸痛，JTCM，45(11)：816，2004)。

隨著細胞分離技術及分子生物學研究的長足發展，藥理研究已逐漸深入到細胞、亞細胞及分子水平，現代的藥理研究也證明漢防己甲素是天然的非選擇性鈣通道阻滯劑，又是鈣調蛋白的天然拮抗劑，影響Ca²⁺跨膜轉運及在細胞內的分布利用(徐永紅，邊城，李定國，蔣祖明，陸漢明，漢防己甲素對成纖維細胞游離Ca²⁺濃度影響的機制探討，胃腸病學和肝血雜志，12(5)：422～423，2003)，因此，漢防己生物堿具有更廣泛的藥理作用和臨床應用前景，在抗肝細胞纖維化、缺氧性肺動脈高壓的防治、特別是逆轉腫瘤化療多藥耐藥性方面引起了人們的高度重視(劉正，金京順，張華芳，劉錫玖，漢防己乙素抗肝缺血再灌注損傷，基礎醫學與臨床，26(11)：1262～1263，2006)。

目前，成熟應用于大規模工業化生產制備漢防己總生物堿的方法仍以溶劑萃取為主，主要步驟包括原藥材粉粹后經醇提、濃縮、調酸、氯仿脫脂、調堿、氯仿、苯等有機溶劑萃取、活性炭脫色、過濾、乙醚、苯、丙酮等重結晶、回收溶劑等步驟分離得到粗總堿(黃潯陽，從粉防己植物中提取漢防己甲素，中成藥研究，3：36-37，1980)。該方法存在以下主要問題：1)提取中多數工藝需要在開放環境中大量使用強毒性的溶劑苯、氯仿等，對操作人員和環境的危害很大；2)活性炭脫色時樣品損失較多；3)方法復雜，可操作性差，生產成本較高。富力等為了改善提取過程中使用強度性溶劑苯的缺陷，開發了一個不含苯的提取方法，申請了中國發明專利(富力，不含苯的漢防己甲素及其制備方法，中國發明專利，CN?1850824A)，但是該方法仍然無法避免步驟繁雜，難以連續化生產的缺陷。近年來，樹脂吸附法在天然產物的提取分離方面顯示了獨特的優越性，與常用的溶劑萃取法相比，工藝設備簡單，投資較少，提取收率較高，生產成本可大大降低，同時，該方法使用溶劑較少，常常只用水和乙醇，且大部分乙醇可以回收，屬于環境友好工藝，在技術水平上有很強的競爭力。王明奎等公開了一種利用離子交換樹脂制備高純度漢防己生物堿的方法(王明奎，崔文峰，鮑玲，李甫，粉防己生物堿的制備工藝，中國發明專利，CN?101288695A)，但是該方法中使用的離子交換樹脂D72，需要在每個工藝流程完成后均需用酸堿反復處理，使其再生后，才能用于下一個使用周期，這勢必帶來工藝操作的復雜，特別是大量含酸、含堿廢水的產生，使得樹脂的優勢有所喪失。更為重要的是，由于離子交換樹脂D72結構特點的限制，如聚苯乙烯的強疏水性骨架、功能基含量較低、樹脂比表面積較小等，都會帶來樹脂處理量的降低和吸附選擇性的變差，所以，在公開的專利方法中，在經過樹脂提取后，得到漢防己粗堿，仍需丙酮、冷苯等萃取、重結晶，才能得到高純度的漢防己總生物堿。