[發(fā)明專利]微生物發(fā)酵法制備花生蛋白多肽的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910069087.7
• 申請日: 2009-06-01
• 公開（公告）號: CN101570774A
• 公開（公告）日: 2009-11-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周慶禮;劉安軍;王維君;陳文東;婁山
• 申請（專利權(quán)）人: 天津市食品加工工程中心
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A23L1/305;C12R1/465
• 代理公司: 天津盛理知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 王來佳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品領(lǐng)域，特別是涉及一種微生物發(fā)酵法制備花生蛋白多肽的方法。

背景技術(shù)

花生蛋白是一種營養(yǎng)價(jià)值較高的植物蛋白，其生物價(jià)(Bv)為58，效率值為117，含有人體所需的8種必需氨基酸，尤其富含精氨酸(9％)，而精氨酸具有免疫促進(jìn)功能，對維護(hù)人體健康和幼兒發(fā)育具有重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)經(jīng)水解制得的肽有比蛋白質(zhì)更好的營養(yǎng)性能；實(shí)驗(yàn)證實(shí)肽的吸收率比氨基酸高，且比氨基酸更易、更快地通過小腸黏膜被人體吸收利用。花生蛋白活性多肽在營養(yǎng)保健領(lǐng)域具有多種卓越的生理功能：一是多肽可由腸道不經(jīng)降解直接吸收，其吸收速度和吸收率比蛋白質(zhì)和氨基酸都高，因而可作為腸道營養(yǎng)劑和流質(zhì)食物的形式提供給處于特殊身體狀況下的人群；二是它不僅提供人體必須的蛋白營養(yǎng)，還能有效降低血液中膽固醇和甘油三脂的含量，加快體內(nèi)耗能，燃燒脂肪，抵抗肥胖；三是花生蛋白活性多肽能夠?yàn)槿梭w提供豐富的氨基酸，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，抑制核糖核酸酶活性下降，清除人體內(nèi)的自由基與重金屬，改善細(xì)胞代謝，為免疫系統(tǒng)制備對抗細(xì)菌和感染的抗體。此外，在提高人體免疫功能方面，花生多肽與其它多肽有顯著不同，花生多肽含有白藜蘆醇，它對心血管疾病和動(dòng)脈硬化有明顯的抑制作用，亦可藉此促進(jìn)人類腫瘤細(xì)胞的凋亡，或是通過腫瘤抑制因子P53的表現(xiàn)來達(dá)到抗腫瘤活性。

目前，多肽的生產(chǎn)主要有合成與蛋白質(zhì)體外水解兩種方法，合成法主要有化學(xué)合成、DNA重組技術(shù)合成、酶法合成等三種方法。合成法雖然可按人們的意愿合成任意活性肽，但目前因?yàn)槌杀靖摺⒏狈磻?yīng)物多及殘留物等問題制約著其發(fā)展；而重組DNA技術(shù)如果有望成功，將會(huì)有廣闊前景。體外水解蛋白質(zhì)為肽有三種方法：酸水解、堿水解及酶法水解，前兩種方法簡單易操作，但可能存在營養(yǎng)和毒理方面有害的效應(yīng)，因此其應(yīng)用受到了一定的限制；蛋白質(zhì)酶法水解能在一定的條件下進(jìn)行定位水解產(chǎn)生特定的肽.且易于控制水解進(jìn)程，并具有高度的專一性，一般不會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)方面的損失，也不會(huì)產(chǎn)生毒理上的問題；同時(shí)酶作用具有特異性，可在溫和條件下進(jìn)行，能耗低，因而能較好地滿足肽的生產(chǎn)需要。在多肽生產(chǎn)中酶的選擇是關(guān)鍵，它不僅影響最后產(chǎn)品的得率、反應(yīng)速度，而且直接影響產(chǎn)品的風(fēng)味和理化特征。

現(xiàn)有的酶解工藝包括單酶酶解和酸解，酶水解易產(chǎn)生苦、咸、澀等不良風(fēng)味圈，影響了食用的要求；此外，還存在著肽鏈長度差別大等問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有工藝制作花生蛋白多肽所存在的不足，提供一種通過專一水解酶結(jié)合微生物連續(xù)發(fā)酵制備花生多肽飲品的方法。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種微生物發(fā)酵法制備花生蛋白多肽的方法，其步驟是：

(1)制備花生蛋白：低溫壓榨花生粕經(jīng)過粉碎、溶解、高壓噴射破乳，然后，用3mol/L的氫氧化鈉調(diào)PH值6-8，于恒溫水中攪拌浸提，低溫真空條件下提取，完全浸提后，將上層油吸出，再將浸提液進(jìn)行離心分離得到花生蛋白質(zhì)；

(2)多肽制備：花生蛋白溶液加熱85-95℃，10-20min后冷卻至常溫，調(diào)解pH6-8，加蛋白酶進(jìn)行酶解，形成蛋白多肽混合液；

(3)微生物發(fā)酵：將上述蛋白多肽混合液加入鏈霉菌培養(yǎng)發(fā)酵，35-40℃，發(fā)酵20-26h；

(4)分離：將上述制備的發(fā)酵液分離菌體，并利用膜過濾的方式，除去大分子肽(蛋白)以及多糖物質(zhì)；

(5)形成成品：將上述濾液直接灌裝殺菌，或者濃縮干燥制粉，即形成成品。

而且，所述蛋白酶為細(xì)菌蛋白酶和菠蘿蛋白酶。

而且，所述蛋白酶酶解時(shí)以0.1mol/L的NaOH滴定，并保持反應(yīng)體系的pH維持恒定。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是：

本發(fā)明采用復(fù)合酶水解，一方面使之達(dá)到一定的酶解程度，另一方面邊酶解邊對其進(jìn)行修飾，以改良酶解產(chǎn)物花生多肽的風(fēng)味，使之作為食品添加劑或營養(yǎng)蛋白質(zhì)的原料。本發(fā)明所采用的微生物蛋白酶，與動(dòng)物蛋白酶、植物蛋白酶相比具有溶解性好、活力高、專一性強(qiáng)的特點(diǎn)，能夠?qū)Φ鞍踪|(zhì)進(jìn)行較深程度的水解。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳述，以下實(shí)施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。

一種微生物發(fā)酵法制備花生蛋白多肽的方法，制備方法的步驟是：