[發(fā)明專利]改良裸鼠結(jié)腸癌原位移植瘤模型的構(gòu)建方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910057431.0
• 申請日: 2009-06-17
• 公開（公告）號: CN101919747A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張靜喆;楊海波;章學(xué)林;蔡駿;宋華榮;梁曉強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院
• 主分類號: A61D7/00
• 分類號: A61D7/00
• 代理公司: 上海浦一知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31211
• 代理人: 潘詩孟

1.一種改良裸鼠結(jié)腸癌原位移植瘤模型的構(gòu)建方法，其特征是，包括如下步驟：

(1)瘤源的制備

將結(jié)腸腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)、傳代后，用對數(shù)生長期的腫瘤細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度至2×10⁷/ml；注射前用碘酊局部皮膚消毒，以0.1ml/只裸鼠，用無菌一次性注射器注入裸鼠右側(cè)腋下皮下；注射完畢后裸鼠自然進(jìn)食；待瘤體直徑達(dá)1cm左右時，處死荷瘤鼠，消毒皮膚，切下瘤塊，去除壞死部分，選用淡黃色或呈魚肉狀瘤組織置于生理鹽水中，剪成直徑2mm的瘤塊備用；

(2)模型制作方法

造模裸鼠禁食4h，以0.5％戊巴比妥溶液35～50mg/kg體重腹腔注射麻醉；用碘酊消毒，取下腹正中或經(jīng)右側(cè)腹直肌切口約2cm，逐層切開腹壁各層，以血管鉗牽開腹膜，辨認(rèn)升結(jié)腸；在距回盲部2cm的升結(jié)腸系膜上沿結(jié)腸腸軸平行方向做一0.3～0.4cm切口，將已制備好的瘤塊2塊置于結(jié)腸系膜內(nèi)血管附近，并用3-0絲線縫合腸系膜切口；常規(guī)縫合腹壁切口，麻醉清醒后自然進(jìn)食；飲水中添加琥乙紅霉素1g/100ml；將裸鼠飼養(yǎng)于無菌層流室中，室溫控制在(25±1)℃，相對濕度40％～50％，連續(xù)觀察3周。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改良裸鼠結(jié)腸癌原位移植瘤模型的構(gòu)建方法，其特征是，瘤源的制備過程中，消毒和注射過程在制備成單細(xì)胞懸液后1小時內(nèi)完成。