[發明專利]編碼草菇真菌免疫調節蛋白的基因序列

無效

• 申請號: 200910047782.3
• 申請日: 2009-03-19
• 公開（公告）號: CN101509001A
• 公開（公告）日: 2009-08-19
• 發明（設計）人: 周選圍;李奇璋;林娟
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C07K14/375;C12R1/645
• 代理公司: 上海交達專利事務所
• 代理人: 王錫麟;王桂忠

技術領域

本發明涉及一種分子生物技術領域的基因序列，具體是一種編碼草菇真菌免疫調節蛋白的基因序列。

背景技術

真菌免疫調節蛋白(Fungal?Immunomodulatory?proteins，FIPs)是從一些高等擔子菌(蘑菇類)子實體中提取的與植物凝集素和免疫球蛋白的結構和免疫功能相似的一類小分子蛋白質。自1989年日本學者Kino等從赤靈芝(Ganodermalucidium)子實體中分離提取出第一個真菌免疫調節蛋白(LZ-8)以來，目前已分別從松杉靈芝(G.tsugae)、金針菇(Flammulina?velutipes)、松茸(Tricholomamatsutake)、蒙古口蘑(T.mongolicum)、大蟬草(Cordyceps?cicadae)和草菇(Volvariella?volvacea)等的子實體中提取出多種真菌免疫調節蛋白，這些免疫調節蛋白的氨基酸序列分別具有60％-70％的同源性，形成了一個新的蛋白家族。該家族的蛋白具有相似的生理功能，如對機體具有重要的免疫調節功能，在體內促進人外周血淋巴細胞和小鼠脾臟細胞的有絲分裂；減少抗原誘導型抗體的形成以及抑制非胖糖尿病小鼠的自身免疫，顯示了對機體免疫能力的抑制作用。不同的真菌免疫調節蛋白家族成員不僅在氨基酸序列上存在差異，在體內與體外具有不同程度的免疫調節功能。

Kino，K等在《Journal?of?Biological?Chemistry》(生物化學雜志)1989年第1期472-478頁發表了題為《Isolation?and?characterization?of?a?newimmunomodulatory?protein，ling?zhi-8(LZ-8)，from?Ganoderma?lucidium》(分離及描述在赤靈芝中的一種新的免疫調節蛋白，ling?zhi-8(LZ-8))一文，文中評述，赤靈芝的真菌免疫調節蛋白(FIP-Glu)在體外具有凝集山羊(sheep綿羊)紅細胞的作用，但對人紅細胞不起作用，在體內能阻止大鼠過敏反應，減少抗體的產生；Ko，J.L等在《European?Journal?of?Biochemistry》(歐洲生化雜志)1995年第2期244-249頁發表了題為《A?New?Fungal?ImmunomodulatoryProtein，FIP-fve?Isolated?from?the?Edible?Mushroom，Flammulina?velutipesand?its?Complete?Amino?Acid?Sequence》(從食用真菌金針菇中分離得到了一種新的真菌免疫調節蛋白，FIP-fve，及其完整的氨基酸序列)一文，文中評述，金針菇的真菌免疫調節蛋白(FIP-Fve)在體外具有凝集人紅細胞的作用，能提高IL-2與干擾素γ的轉錄表達，可激活人外周血淋巴細胞，在體內也能阻止過敏反應；Hsu，H.C等在《Biochemical?Journal》(生物化學雜志)1997年增刊第2期557-565頁發表了題為《Fip-vvo，a?new?fungal?immunomodulatory?proteinisolated?from?Volvariella?volvacea》(從草菇中分離到了一種新的真菌免疫調節蛋白，Fip-vvo)一文，文中評述，草菇的真菌免疫調節蛋白(FIP-Vvo)在體外具有凝集兔紅細胞的作用，可激活人外周血淋巴細胞，也可提高IL-2，IL-4與干擾素γ的轉錄表達，在體內能減小小鼠阿爾圖斯反應，但不能阻止過敏反應。不僅如此，不同的FIP家族成員在促發免疫響應過程中存在劑量效應。比如在對小鼠血凝集實驗中，FIP-Glu的最低有效濃度為0.10μg/mL、FIP-Vvo的最低有效濃度為0.05μg/mL。不同的真菌免疫調節蛋白家族成員在激活人外周血淋巴細胞(hPBL)增殖時有效劑量不同，如FIP-Fve的有效濃度為100μg/mL，而FIP-vvo的有效濃度僅為5μg/mL；由于真菌免疫調節蛋白在真菌的子實體中含量較低，Hsu，H.C等在《Biochemical?Journal》(生化雜志)1997年增刊第2期557-565頁發表了題為《Fip-vvo，a?new?fungal?immunomodulatory?protein?isolated?fromVolvariella?volvacea》(從草菇中分離到了一種新的真菌免疫調節蛋白，Fip-vvo)一文，文中評述，從3kg草菇子實體中提純Fip-vvo，經不同純化步驟最終所獲得的蛋白質僅115mg，并且直接從這些真菌中提取天然的免疫調節蛋白成本較高且費時，因此利用基因工程技術生產有活性的真菌免疫調節蛋白，其前景受到關注。