[發明專利]用于柑橘潰瘍病菌檢測的引物對及檢測方法

無效

• 申請號: 200910044688.2
• 申請日: 2009-11-04
• 公開（公告）號: CN101712983A
• 公開（公告）日: 2010-05-26
• 發明（設計）人: 朱金國;陳小帆;王象賢;莫瑾;左靜
• 申請（專利權）人: 中華人民共和國湖南出入境檢驗檢疫局
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/64
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏

1.用于柑橘潰瘍病菌檢測的引物，其核苷酸序列為：

SEQ?ID?NO.1：5’-ACGCTCGATCTGCACCTATT-3’；

SEQ?ID?NO.2：5’-CCAACGAGTCTCAAGCATCA-3’；

SEQ?ID?NO.3：5’-CGCCATCCCCACCACCACCACGAC-3’；

SEQ?ID?NO.4：5’-AACCGCTCAATGCCATCCACTTCA-3’。

2.一種以SEQ?ID?NO.1或2為引物與柑橘潰瘍病菌DNA中核酸特異性位 點相結合擴增出的核酸分子。

3.一種檢測柑橘潰瘍病菌的方法，該方法以柑橘潰瘍病菌提取出的的DNA 為模版，利用權利要求1所述的引物進行雙重PCR擴增，反應結束后應用DHPLC 對雙重PCR產物序列進行檢測分析，建立以引物SEQ?ID?NO.1或2擴增柑橘潰 瘍病菌DNA的PCR產物作為分子標本的標準體系對未知菌是否為柑橘潰瘍病菌進 行判定。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，雙重PCR的反應過程中的退火 溫度為63℃。

5.如權利要求3所述的方法，其特征在于，DHPLC檢測過程中，檢測片段 設定大小為236bp。

6.如權利要求3所述的方法，其特征在于，DHPLC判定過程中，應用權利 要求2中的核酸分子作為分子標本并建立分子標準體系進行柑橘潰瘍病菌的判 定，檢測柱溫為50℃。

7.含有權利要求1所述引物的試劑盒。

8.如權利要求7所述的試劑盒，其還包括權利要求2所述的核酸分子。