[發明專利]一種鳥嘌呤核苷的生產方法無效
| 申請號: | 200910042786.2 | 申請日: | 2009-03-04 |
| 公開(公告)號: | CN101487036A | 公開(公告)日: | 2009-07-22 |
| 發明(設計)人: | 鐘廣新;蔡傳康 | 申請(專利權)人: | 湖南賽康德生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12P19/40 | 分類號: | C12P19/40;C12R1/125 |
| 代理公司: | 常德市源友專利代理事務所 | 代理人: | 易炳炎 |
| 地址: | 415400*** | 國省代碼: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 嘌呤 核苷 生產 方法 | ||
1、一種鳥嘌呤核苷的生產方法,其特征是:
(1)、搖瓶液體菌種培養:
①選用枯草芽孢菌TA208-IMPD為保藏菌種;
②將葡萄糖、無機鹽、有機氮等配制的初級菌種培養基裝入茄瓶;
③接入保藏菌種,接種量為0.1%,在溫度36℃條件下靜置培養24h后獲初級菌種;
④將初級菌種放入搖瓶,接種量為0.1%,在往復式搖床上培養,轉速160轉/分,溫度36℃,時間周期10-12h,當菌種鏡檢及OD等各項指標達標后即獲搖瓶液體菌種。
(2)、葡萄糖液生產:
①將碎米在浸泡罐內浸泡時間4h,維持溫度40℃;
②用砂磨機將碎米磨成米漿,其細度為30目,濃度達18Be°-20Be°;
③將米漿用液化噴射器在105℃-108℃條件下高溫液化,然后進入維持罐保溫維持80-120min;
④將液化料液經板框壓濾機壓濾,壓濾溫度80℃左右,壓力≤0.25Mpa;
⑤將液化液泵入糖化罐進行糖化,糖化溫度保持為60℃,糖化周期33h-36h;
⑥糖化后用板框壓濾機壓濾糖化液,得葡萄糖液;壓濾溫度60℃左右,壓力≤0.25MPa。
(3)、鳥苷發酵液制?。?/p>
①將葡萄糖液、無機鹽、有機氮等配制的二級菌種培養基經121℃左右、15min蒸汽滅菌后泵入二級種子罐,降溫至36℃后,接入搖瓶菌種接種量為0.1%,同時將經過0.25-0.3Mpa壓縮、過濾后的無菌空氣輸入二級種子罐,此時通風比1:0.2-0.4v/V.min,pH6-8,壓力0.03-0.1MPa,培養10h-12h,經菌種鏡檢及OD等各項指標達標后即獲得二級菌種;
②將葡萄糖液、無機鹽、有機氮配制的發酵培養基經121℃左右、15min蒸汽滅菌后泵入發酵罐,降溫至36℃左右后接入二級菌種,接種量為10%;同時在上述①中保壓無菌空氣輸入的條件下將經118℃左右、10min蒸汽滅菌后的40-60g/dL葡萄糖液進行流加;此時通風比為1:0.2-0.8v/V.min,pH6-8,壓力0.03MPa-0.1MPa,發酵50h-60h;當產苷達到38g/L、轉化率20%時,即獲得鳥苷發酵液。
(4)、鳥苷提取精制:
①將鳥苷發酵液送入提取儲料罐,加熱至60℃左右,用硫酸調PH值為2-4,經微濾膜除菌后送入粗品鳥苷結晶罐攪拌降溫至4℃-10℃、調PH為7、時間10h-12h后獲初級鳥苷晶體;微濾控制溫度60℃左右,壓力≤0.35Mpa,流速80L/m2.h——100L/m2.h;
②將初級鳥苷晶體用板框壓濾機分離后,控制過濾壓力≤0.25Mpa;粗級鳥苷晶體重新溶解,并配置含量達到30g/L-45g/L的鳥苷溶液使其充分溶解;將充分溶解后的粗級鳥苷晶體經超濾膜進行脫色、除雜后送入精品鳥苷結晶罐攪拌降溫后獲得精級鳥苷晶體;超濾膜溫度60℃左右,壓力≤0.35Mpa,流速100L/m2.h——120L/m2.h;攪伴降溫至4℃-10℃,時間10h-12h;
③將精級鳥苷晶體用板框壓濾機分離,壓濾壓力≤0.25Mpa;然后在溫度70℃-80℃、真空度0.06Mpa-0.08Mpa的條件下進行真空干燥機烘干,最后包裝獲合格鳥苷產品。
2、根據權利要求1所述的一種鳥嘌呤核苷生產及其制備方法,其特征是初級菌種培養基的成分比為葡萄糖:磷酸氫二鉀:硫酸鎂:酵母粉:瓊脂:水=1%:0.2%:0.1%:2%::2%:94.7%。
3、根據權利要求1所述的一種鳥嘌呤核苷生產及其制備方法,其特征是二級菌種培養基的成分比為葡萄糖:磷酸氫二鉀:硫酸鎂:酵母粉:水=5%:0.2%:0.1%:1.5%:93.2%。
4、根據權利要求1所述的一種鳥嘌呤核苷生產及其制備方法,其特征是發酵培養基的成分比為葡萄糖:磷酸氫二鉀:硫酸鎂:酵母粉:水=15%:0.2%:0.1%:1.0%:83.7%。
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