[發明專利]桑葉γ-氨基丁酸的提取方法及其應用

有效

• 申請號: 200910040513.4
• 申請日: 2009-06-24
• 公開（公告）號: CN101633623B
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 林健榮;陳恒文;鐘楊生;王葉元;廖富蘋;藍年新
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07C229/08
• 分類號: C07C229/08;C07C227/28;A61K31/197;A61P3/02;A61P43/00;A23L1/305
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 林麗明

1.一種桑葉γ-氨基丁酸的提取方法，其特征在于包括以下步 驟：

(1)桑葉干燥后進行粉碎；

(2)取干桑葉粉加水浸泡，超聲波-微波協同萃取，收集萃取 上清液，旋轉蒸發濃縮制得γ-氨基丁酸粗提液；

(3)γ-氨基丁酸粗提液經無水乙醇沉淀去除部分雜蛋白和多糖 類物質，再經三級分離純化制得γ-氨基丁酸白色結晶體。

2.根據權利要求1所述桑葉γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步驟(1)所述桑葉干燥是采摘桑葉葉片，洗凈晾干后烘干粉碎； 所述烘干是置于烘箱，在83～87℃烘28～32min后降溫至63～67 ℃烘4～4.5h。

3.根據權利要求1所述桑葉γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步驟(2)所述桑葉粉與水的料液比按照桑葉粉重量克數：水體 積毫升數為1∶30～1∶35；浸泡時間為13～17min；所述微波為144W、 超聲波為50W；萃取時間為160～170秒。

4.根據權利要求1所述桑葉γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步驟(3)包括以下步驟：

A用無水乙醇沉淀法去除部分雜蛋白和多糖類物質；

B用大孔樹脂S-8進行一級分離純化；

C用葡聚糖凝膠G-10進行二級分離純化；

D用732磺酸型陽離子樹脂進行三級分離純化；

E將經過三級分離純化后的桑葉γ-氨基丁酸產物經旋轉蒸發、 冷凍干燥，獲得結晶。

5.根據權利要求4所述桑葉γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步驟A是取粗提液，按體積比1∶2倍量加入無水乙醇，過夜，在 3000r/min離心10min，棄沉淀，旋轉蒸發濃縮。

6.根據權利要求4所述桑葉γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步驟B是樹脂濕法裝柱，充分平衡后，取經醇沉淀法分離的提取 液，調pH值為5，上樣，流速控制2mL/min，收集洗脫液得濃縮液。

7.根據權利要求4所述桑葉γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步驟C是將濃縮液上柱，蒸餾水洗脫，流速3mL/min，收集洗 脫液，旋轉蒸發得濃縮液。

8.根據權利要求4所述桑葉γ-氨基丁酸的提取方法，其特征 在于步驟D是將步驟C制備的濃縮液調pH值為3，上柱，流速控制2 mL/min，吸附完畢后用蒸餾水洗至pH值為6，用0.25mol/L氨水進 行洗脫，洗脫過程中不斷用茚三酮丙酮試紙檢測pH變化，當茚三酮 反應呈藍色，pH值為6時，收集流出液，直至茚三酮藍色反應消失 為止，合并流出液，進行濃縮，冷凍干燥。