[發明專利]一種無創性產前篩查21-三體綜合征的試劑盒

有效

• 申請號: 200910038863.7
• 申請日: 2009-04-22
• 公開（公告）號: CN101871002A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發明（設計）人: 李明;陳華云;陳嘉昌
• 申請（專利權）人: 中山大學達安基因股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種無創性產前篩查21-三體綜合征的試劑盒，試劑盒包括：(a)逆轉錄酶系及逆轉錄反應液、(b)雜交反應液、(c)耐熱的連接酶和連接反應液、(d)可熱啟動的耐熱DNA聚合酶和PCR反應體系、(e)質控品，其特征在于雜交反應液包括1.5M?KCl和20mM?Tris-Cl及探針混合物，其中使用的探針混合物的序列分別為，針對rs8130833位點的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGAAAGCCTGTGTCCACTGTGGA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGAAGTAGTTGATGGAAATGAGGGAACACTCA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGTAAGCAAGTAGTTGATGGAAATGAGGGAACACTCT-3’；

針對rs7844位點的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGAATATTGTCATCCGCTTGCTGTGCTGTGGGG-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGAAAAAGTAGAGGAAAAAGTGTGTGGTTAAG-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGCCCAGAAAAAGTAGAGGAAAAAGTGTGTGGTTAAT-3’；

針對rs9015位點的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGAATCACTGCGCCTACTATACGCAAAAGGGCCCCTGG-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGCTCTGGTGAGAGAGAACAATAACAACAAAA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGAACTGCTCTGGTGAGAGAGAACAATAACAACAAAT-3’；

針對rs13643位點的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGACCCAGTTCTGTAAATAACTTGAATCCAGTTGTCTTGTATA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGTTTTATTTAATATGTTTTTGGGTATATGTA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGGGTCATTTTATTTAATATGTTTTTGGGTATATGTG-3’；針對rs9305729位點的是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGATTTAAAATGGTTAAAATGGCTTTAAATGGTGACCAGCTTTGCATG-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGCCTTGGTTCTCGGTGATCTAGATAAAGTTA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTGTGGTACCTTGGTTCTCGGTGATCTAGATAAAGTTG-3’。

2.根據權利要求1的試劑盒，其特征還在于PCR反應體系包括20mM?Tris-Cl，20mM?KCl，2mMMgCl₂，熒光染料標記的上游、下游寡核苷酸引物，其中上游和下游寡核苷酸引物的序列分別是：

5’-GTGCCACAATCTAGAGGGAGA-3’、

5’-GGGTTCCCTAAGCAATCGTTG-3’。

3.根據權利要求1的試劑盒，其特征還在于雜交反應液中探針混合物濃度范圍0.01fM-100fM。

4.根據權利要求1的試劑盒，其特征還在于PCR反應體系中上游、下游引物濃度范圍為0.05μM-10.0μM。

5.根據權利要求1的試劑盒，其特征在于每人份PCR反應體系中加入2單位耐熱DNA聚合酶’。

6.根據權利要求1的試劑盒，其特征還在于逆轉錄反應液包括50mM?Tris-HCl，50mMKCl，4mM?MgCl₂，10mM?DTT及20pM市售的隨機引物，每人份逆轉錄反應液中加入100單位逆轉錄酶。

7.根據權利要求1的試劑盒，其特征還在于連接反應液包括20mM?Tris-HCl，24mMNaAC，15mM?MgCl₂，每人份連接反應液中加入1單位連接酶。