[發明專利]快速的化學發光免疫檢測系統及分析方法

無效

• 申請號: 200910029449.X
• 申請日: 2009-04-14
• 公開（公告）號: CN101865912A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 劉宏;嚴楓;鞠熀先
• 申請（專利權）人: 南京大學;江蘇省腫瘤醫院
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N21/76;G01N33/551
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速的化學發光免疫檢測系統及分析方法，其特征在于該系統由溶液傳輸系統、溫育系統、磁分離系統、信號采集系統構成。其中溶液傳輸系統由小試管(1-4)、多位閥(5)、蠕動泵(6)和硅橡膠管(7)所組成。小試管(1)裝有待測樣品、酶標記抗體和表面固定了抗體的磁珠混合物，小試管(2)裝有洗滌緩沖液，小試管(3)裝有化學發光底物液，小試管(4)裝有鹽酸溶液。四個小試管分別連接到多位閥(5)的四個入口，而多位閥出口連接到蠕動泵(6)的硅橡膠管(7)，由蠕動泵(6)結合多位閥(5)實現不同溶液的傳輸。溫育系統由玻璃螺旋管(8)和真空紅外加熱管(9)組成，溫育混合物溶液在蠕動泵的推動下在玻璃螺旋管(8)中來回流動，以加速免疫試劑的混合，同時由真空紅外加熱管(9)將螺旋管中溫育混合物溶液快速加熱到37℃，并在溫育過程中保持此溫度。磁分離系統由玻璃盤管(10)和永磁鐵(11)組成，永磁鐵(11)放在玻璃盤管(10)下，可捕獲溫育過后的磁珠及其表面形成的復合物。信號采集系統由玻璃盤管(12)和光電倍增管(13)組成。玻璃盤管(12)置于光電倍增管(13)的光窗前，當待檢測的溶液區帶流過玻璃盤管時，其化學發光信號可被光電倍增管(13)采集。

2.根據權利要求1所述的檢測系統，其特征在于所述的多位閥(5)可通過轉動實現不同流路的切換。多位閥(5)的轉動由計算機控制。

3.根據權利要求1所述的檢測系統，其特征在于所述的蠕動泵(6)的轉速、流體流速和流動方向通過計算機進行自動調節。

4.根據權利要求1所述的檢測系統，其特征在于所述的溫育系統可使溫育混合物溶液在玻璃螺旋管(8)中來回流動，以加速免疫試劑的混合。同時由真空紅外加熱管(9)將螺旋管中溫育混合物溶液快速加熱到37℃，并在溫育過程中保持此溫度。這樣就通過混合和加熱的方法實現了免疫反應的雙重加速。

5.根據權利要求1所述的檢測系統，其特征在于所述的永磁鐵(11)用于收集溫育反應后在玻璃盤管(10)內懸浮液中的磁珠。玻璃盤管(10)可有效地防止磁珠的聚集并且便于磁珠的重新混合。

6.根據權利要求1所述的檢測系統，玻璃盤管(12)可用于增強待檢測溶液區帶的混合，從而增強化學發光，增加檢測器所能接受的光信號。

7.一種快速的化學發光免疫檢測系統及分析方法，其分析步驟如下：

①將樣品、固定了捕獲抗體的磁珠與辣根過氧化物酶標記的抗體加入到溶液傳輸系統的小試管(1)中，用蠕動泵(6)提供動力將小試管(1)中溫育混合物溶液經由多位閥(5)和硅橡膠管(7)通入螺旋玻璃管(8)中，并在螺旋玻璃管(8)中來回流動，同時用真空紅外石英管將溫育混合物溶液快速加熱到37℃，并在溫育過程中保持此溫度；

②將溫育混合物溶液通入玻璃盤管(10)，用永磁鐵(11)收集溫育反應后的懸浮液中的磁珠，并轉動多位閥(5)，通入小試管(2)中的洗滌緩沖液對磁珠進行洗滌；

③轉動多位閥(5)，通入小試管(3)中的化學發光底物液與磁珠混合，由磁珠表面免疫復合物上標記的辣根過氧化物酶引發化學發光反應，將磁珠與化學發光底物液的混合溶液通入玻璃盤管(12)，由光電倍增管收集化學發光信號

④轉動多位閥(5)，通入小試管(4)中的鹽酸溶液消除殘留信號，并對系統通道進行洗滌，轉動多位閥(5)，通入小試管(2)中的洗滌緩沖液對系統通道進行洗滌，為下一次檢測做準備。

⑤最后收集磁珠，用再生緩沖液再生，可重復使用。

8.根據權利要求8所述的分析方法，其特征在于步驟②和④中的洗滌緩沖液為0.01M磷酸鹽緩沖液，pH?7.4，含0.05％吐溫-20；步驟④中的鹽酸溶液為0.1M鹽酸溶液。

9.根據權利要求8所述的分析方法，其特征在于步驟③中的底物液為魯米諾、雙氧水和對碘苯酚溶液。

10.根據權利要求8所述的分析方法，其特征在于步驟⑤中使用的再生緩沖液為0.1M甘氨酸/鹽酸緩沖液，pH?2.0。