[發(fā)明專利]一種新型雙水相萃取越桔中花青素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910011206.3
• 申請日: 2009-04-17
• 公開（公告）號: CN101531652A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發(fā)明（設計）人: 修志龍;張華;許鴿;李夢露;都麗婭
• 申請（專利權(quán)）人: 大連理工大學
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;A23L1/30;A23L1/275;A61P35/00;A61P39/06;A61P9/12;A61P1/16
• 代理公司: 大連理工大學專利中心
• 代理人: 侯明遠

技術領域

本發(fā)明屬于生物工程技術領域，涉及一種從越桔中萃取花青素的方法，特 別涉及一種雙水相萃取越桔果實殘渣中花青素的方法。

背景技術

花青素是一類廣泛存在于植物中的水溶性色素，屬于類黃酮化合物。多用 在飲料、果醬、糖果及糕點中，屬于功能性食品添加劑，另外也可用作藥品、 化妝品等。作為天然色素，花青素具有較高的安全性能，而且具有抗突變、抗 氧化、降血壓、保護肝臟等功能。歐洲把花青素含量大于24％的色素提取物作 為藥用，其中歐洲越桔花青素的提取物(Mytrocyan)已被意大利、德國等國的 藥典收載。

目前花青素的提取以越桔、藍靛果忍冬等為原料的居多。越桔(Vaccinium? uliginosum?L.)為杜鵑花科(Ericaceae)越桔屬(Vaccinium?L.)植物，果實常被用來釀 酒或加工成飲料及制果醬，也常用作食品著色劑，而花青素含量最高的果皮則 沒有得到充分利用。

花青素的常用提取方法主要有兩種：有機溶劑萃取法和酸化乙醇法(園藝 學報，2008，35(5)：655～660；大連輕工業(yè)學院學報，2007，26(3)：196～198； 中國專利：CN1580052A)，其中酸化乙醇法最為常用，該方法是采用50％的pH 3.50的乙醇水溶液50℃回流2h，需要較多有機溶劑，且需要加熱較長時間，導致 成本較高，不利于花青素的工業(yè)化生產(chǎn)。

雙水相萃取技術始于20世紀60年代，其常用的體系為聚乙二醇/葡聚糖和 聚乙二醇/無機鹽等。由于雙水相萃取條件溫和，容易放大，可連續(xù)操作，因此 該技術已成功地應用于蛋白質(zhì)、核酸和病毒等生物產(chǎn)品的分離和純化中，也有 抗生素、中藥有效成分等小分子分離方面的嘗試(福建分析測試，2008，17(1)： 4～6；中國藥學雜志，2007，42(7)：541～544)。近幾年一些研究者在進行溶劑 析出結(jié)晶研究時發(fā)現(xiàn)，在適當溫度條件下，如果體系中無機鹽、有機溶劑和水 的濃度適當，這類體系中的鹽不會結(jié)晶析出，而是出現(xiàn)液液分相現(xiàn)象。如果所 用有機溶劑是親水性低分子物質(zhì)，如甲醇、乙醇、丙酮等，就可以形成一種雙 水相萃取體系。與傳統(tǒng)的高分子聚合物雙水相體系相比，這種雙水相體系分相 更清晰，成本更低，萃取相不含粘度大、難處理的聚合物。盡管這方面的研究 在國內(nèi)外剛剛起步，但已表現(xiàn)出良好的應用前景，如用磷酸氫二鉀/乙醇體系萃 取牛血清白蛋白、α-酪蛋白、核糖核酸酶等生物大分子(Biotechnology? Techniques，1998，12(5)：363～365)，用丙酮/氯化鈉體系萃取金屬絡合物或金 屬離子(應用化學，2001，18(3)：241～243；分析測試學報，2002，21(3)： 75～77)，用乙醇/硫酸銨體系萃取甘草酸鉀、白藜蘆醇、葛根素(精細化工，2004， 21(3)：165～173；天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006，18：647～649；時珍國醫(yī)國藥， 2008，19(1)：13～15)，用雙水相體系萃取發(fā)酵液中1，3-丙二醇和2，3-丁二醇(中 國專利：CN?101012151A；CN?101012152A)，均取得令人滿意的效果。

在色素提取方面，雙水相萃取的研究也日益增多，如S.Chethana等人采用聚 乙二醇/硫酸銨體系萃取水溶性色素甜菜紅堿(J.Food?Eng.，2007，81：679～687)， 但由于水溶性高聚物大多粘度較大，難以揮發(fā)，需要反萃取，使后續(xù)的分離較 為麻煩，且高聚物價格比較昂貴，工業(yè)化應用易受到限制。盧俊彩等人用丙酮/ 硫酸銨體系分離脂溶性色素紅花紅色素(化學研究與應用，2007，19(6)： 679～682)，先將原料經(jīng)過水洗、堿溶、酸沉后制得紅色素粗品，再將其溶于丙 酮中，除去不溶物后再加入硫酸銨溶液，顯然這種方法操作步驟過多，沒有體 現(xiàn)出雙水相萃取步驟少，分離快的優(yōu)點。親水性低分子有機物/無機鹽體系直接 從果渣中萃取天然色素的研究未見文獻報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術問題是從越桔中提取花青素現(xiàn)有技術中存在的提取效 率低、溶劑用量大、成本高等問題，本發(fā)明提供了一種雙水相直接從越桔果渣 中快速萃取花青素的方法。

本發(fā)明的技術方案是：

將含有花青素的果實破碎勻漿，經(jīng)沉降、過濾或離心后得果渣；加入無機 鹽溶液和親水性低分子有機物，攪拌均勻，靜置分相，花青素被萃取到上相， 殘渣分配在下相或兩相之間。