[發明專利]調節對比度顯微鏡

有效

• 申請號: 200880123124.1
• 申請日: 2008-11-18
• 公開（公告）號: CN101910905A
• 公開（公告）日: 2010-12-08
• 發明（設計）人: 松為久美子
• 申請（專利權）人: 株式會社尼康
• 主分類號: G02B21/00
• 分類號: G02B21/00;G02B21/08
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘士霖;江河清

技術領域

本發明涉及調節對比度顯微鏡，且更具體地涉及允許提高對比度的調節對比度顯微鏡。

背景技術

所謂的調節對比度顯微鏡觀察法(霍夫曼調節對比度)是專利文獻1中公開的已知顯微鏡觀察法。制造商基于專利文獻1中公開的原理制造對比度顯微鏡。

專利文獻2公開了基于專利文獻1的原理的調節對比度顯微鏡。該調節對比度顯微鏡包括光源、會聚透鏡、布置在會聚透鏡的前側焦點位置的光圈(aperture)、物鏡以及布置在與光圈基本上共軛且具有透過率T(％)的區域的位置處的調節器，其中顯微鏡被配置成滿足公式(1)和公式(2)的條件：

1.05＜|(Mo′×fc)/(Mc′×fr)|＜1.4????(1)

8＜T＜25??????????????????????????????(2)

在公式(1)和公式(2)中，Mo′表示在垂直于設置調節器的光軸的平面內的透過率T的區域在徑向方向的尺寸，Mc′表示以顯微鏡光軸為中心、在徑向方向上的光圈的尺寸，fc是會聚透鏡的焦距，且fr是從樣本的表面直到調節器的光學系統的焦距。

除了公式(1)和公式(2)，專利文獻2還公開了顯微鏡進一步滿足公式(3)的條件的例子：

0.2R＜D＜0.6R????(3)

在公式(3)中，R表示布置調節器的平面的有效半徑的尺寸，且D表示從透過率T的區域到顯微鏡光軸的距離。

專利文獻1：日本專利申請公開51-128548

專利文獻2：日本專利申請公開2003-131139

如專利文獻2中所示，近年來所謂的ICSI(intracytoplasmic?sperminjection，卵細胞質內精子注入法)已用作針對不孕治療的體外受精技術。

為了將精子注射入卵細胞中，ICSI的正常程序通常包括首先從精子的尾部吸入精子。必須選擇良好形態的精子，且必須保證從尾部的最末端用吸液管吸入精子，以不損壞精子，從而增加受精成功率。

然而，在專利文獻1和專利文獻2中闡述的調節對比度顯微鏡觀察法條件下，對于精子而言對比度弱，而精子在ICSI中與卵子同樣重要。在精子的尾端對比度特別地弱。上述方法的問題在于，結果是難以區分小形式的精子內的尾端部分，且因此難以選擇良好形態的精子，并難以從尾部的最端部用吸液管吸入精子。

具體地，專利文獻2闡述了“通過將部分光圈和透過率T的區域的長度設置為在以上公式(1)的范圍內，也在諸如卵子的透明帶和卵子顆粒等的精細部分中，在分辨率和對比度之間有良好的平衡，而沒有過度的對比度，這樣優化了視圖，”。然而，專利文獻2沒有闡述針對公式(2)中的透過率T的任何基本原理，也沒有提及任何對于精子(特別是尾部)的對比度。

發明內容

考慮到以上問題，本發明的目的是提供調節對比度顯微鏡，該調節對比度顯微鏡通過改進尾部的端部的對比度，提供了ICSI中精子的良好視圖，特別是ICSI中精子操作期間的良好視圖。

本發明的調節對比度顯微鏡是包括光圈構件和調節器的調節對比度顯微鏡，其中光圈構件布置在會聚透鏡的前側焦平面處或附近并具有第一部分光圈，調節器布置在與光圈構件基本上共軛的平面處并在物鏡或其共軛平面的后側焦平面處或附近，其中對應于第一部分光圈的調節器的預定區域的透過率T(％)滿足1≤T≤8。

更優選地，對應于第一部分光圈的調節器的預定區域的透過率T(％)滿足5≤T≤8。

顯微鏡滿足1.0≤Mo/Mc≤1.3，其中Mc表示調節器上的第一部分光圈的圖像的寬度，且Mo表示具有透過率T(％)的調節器的預定區域的寬度。

更優選地，顯微鏡滿足1.0≤Mo/Mc≤1.2。

光圈構件還具有用于調節對比度的第二部分光圈。

本發明通過改進尾部的端部的對比度提供了ICSI中精子的良好視圖，特別是ICSI中精子操作期間的良好視圖。

附圖說明

圖1是示出調節對比度顯微鏡的配置的示意圖；

圖2是光學系統的示意圖；

圖3是示出光圈構件的細節的圖；

圖4是示出調節器的細節的圖；

圖5是示出具有第二部分光圈的光圈構件的細節的圖；

圖6是表示樣本(A)的一維仿真圖像的圖；

圖7是表示樣本(B)的一維仿真圖像的圖；

圖8是表示樣本(C)的一維仿真圖像的圖；

圖9是表示對比度值和透過率T的各個值之間的關系的圖；以及

圖10是示出在物鏡的后側焦平面上的光圈構件和調節器的投影的示意圖。