[發(fā)明專利]用于體內(nèi)遞送至哺乳動物細胞的、包含無質(zhì)粒的功能性核酸的、源自細菌的完整小細胞

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200880018076.X
• 申請日: 2008-03-26
• 公開（公告）號: CN101715489A
• 公開（公告）日: 2010-05-26
• 發(fā)明（設計）人: 希曼休·布蘭巴特;珍妮弗·麥克迪爾米德;托比·哈爾夫
• 申請（專利權）人: 因詹尼克分子遞送控股有限公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/87;A61K48/00
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利代理有限公司 44202
• 代理人: 溫旭;郝傳鑫

1.一種組合物，所述組合物包括：

(a)多個完整的、源自細菌的無核形式的小細胞，其中所述多個完整的、 源自細菌的小細胞中的每個小細胞包含調(diào)節(jié)性RNA，和

(b)用于小細胞的藥學上可接受的載體，

其中：(1)所述小細胞不含用于所述調(diào)節(jié)性RNA的原位表達的構建體， (2)所述調(diào)節(jié)性RNA通過與所述小細胞在沒有所述構建體的條件下共培養(yǎng) 而被直接包裹進所述小細胞內(nèi)，(3)所述調(diào)節(jié)性RNA選自：siRNA、 miRNA和shRNA，并且(4)所述多個完整的、源自細菌的無核形式的小細 胞含有治療上有效量的所述調(diào)節(jié)性RNA。

2.如權利要求1所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA靶定編碼介導抗藥 性、抗凋亡性或瘤生成的蛋白質(zhì)的RNA轉錄體。

3.如權利要求1所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA靶定P-糖蛋白、MDR- 2或MDR-3的轉錄體。

4.如權利要求1所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA靶定MRP2、BCR- ABL、介導STI-571耐藥性的蛋白、肺耐藥相關蛋白LRP、環(huán)氧酶-2、核因子 κ、XRCC1、ERCC1、GSTP1、突變的β-微管蛋白或生長因子的轉錄體。

5.如權利要求1所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA靶定Bcl-2、Bcl-XL、 A1/Bfl1、黏著斑激酶或p53蛋白的轉錄體。

6.如權利要求1所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA靶定β-聯(lián)蛋白、PKC- α、C-RAF、K-Ras、DP97Dead框RNA解旋酶、cdk1、DNMT1、FLIP、C- Sfc、53BPI、聚梳家族蛋白EZH2、ErbB1、HPV-16E5和E7、Fortilin& MCI1P、KSP、DIP13α、MBD2、p21、KLF4、tpt/TCTP、SPK1&SPK2、 P300、PLK1、Trp53、Ras、ErbB1、VEGF或BAG-1的轉錄體。

7.如權利要求1所述的組合物，其進一步包含藥物。

8.如權利要求7所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA靶定編碼介導對所述 藥物的耐藥性的蛋白質(zhì)的轉錄體。

9.如權利要求8所述的組合物，其中，所述藥物被包裹在完整的、源自細菌 的無核形式的小細胞內(nèi)。

10.如權利要求9所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA和所述藥物被包裹在 相同的小細胞內(nèi)。

11.如權利要求1所述的組合物，其進一步包含雙特異性配體。

12.如權利要求11所述的組合物，其中，所述雙特異性配體包含攜帶對小細 胞表面結構特異性的第一個臂和攜帶對非噬菌性哺乳動物細胞表面受體特異 性的第二個臂。

13.如權利要求12所述的組合物，其中，所述哺乳動物細胞表面受體能夠激 活所述小細胞的受體介導的內(nèi)吞作用。

14.如權利要求11所述的組合物，其中，所述雙特異性配體包含抗體或抗體 片段。

15.如權利要求1所述的組合物，其中，所述組合物中每10⁹個小細胞含有約1 個污染性親代細菌細胞或者更少。

16.如權利要求1所述的組合物，其中，所述組合物中每10¹⁰個小細胞含有約1 個污染性親代細菌細胞或者更少。

17.如權利要求1所述的組合物，其中，所述組合物中每10¹¹個小細胞含有個 小細胞含有約1個污染性親代細菌細胞或者更少。

18.如權利要求1所述的組合物，其作為藥劑使用。

19.如權利要求18所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA是shRNA。

20.如權利要求18所述的組合物，其中，所述調(diào)節(jié)性RNA是siRNA。