[發明專利]表達豬類病毒基因的浣熊痘病毒

無效

• 申請號: 200880017817.2
• 申請日: 2008-05-28
• 公開（公告）號: CN101730742A
• 公開（公告）日: 2010-06-09
• 發明（設計）人: 斯蒂芬·奇圖·吳;邁克爾·A·吉爾;信覺·朱
• 申請（專利權）人: 惠氏有限責任公司
• 主分類號: C12N15/86
• 分類號: C12N15/86
• 代理公司: 北京律盟知識產權代理有限責任公司 11287
• 代理人: 劉國偉

技術領域

本發明涉及表達單獨豬繁殖與呼吸綜合癥病毒(PRRSV)基因或其與豬圓環病毒(PCV)基因的組合的新穎重組浣熊痘病毒載體、及所述載體作為疫苗在由PCV及/或PRRSV所引起的疾病預防中的用途。

背景技術

豬繁殖與呼吸綜合癥病毒(PRRSV)是正鏈RNA病毒，其是動脈病毒科(Arteriviridae)動脈病毒屬(genus?Arterivirus)家族的成員。PRRSV感染豬，引起最初于1987年在北美檢測到的“神秘豬疾病”，隨后所述疾病在1990年傳播至歐洲并傳遍歐洲。自1990年以來，PRRSV已成為豬產業的主要全球性威脅，給豬群造成嚴重生產損失。

現稱為豬繁殖與呼吸綜合癥(PRRS)的神秘豬疾病(也稱為藍耳病、豬流行性流產及呼吸綜合癥(PEARS)或呼吸綜合癥(SIRS))的特征在于妊娠母豬的繁殖障礙，此導致妊娠期的最后階段期間異常高數量流產、厭食癥、死產、干癟胎兒、母豬分娩后呼吸問題及仔豬虛弱(出生之后不久即死于呼吸系統疾病或二次感染)。在仔豬中，感染PRRSV造成呼吸窘迫及可能高達70％及更高仔豬死亡率的高死亡率。年長豬可能顯示呼吸系統疾病或二次感染的輕微體征。所述病毒在豬群體中快速傳播，且畜群中高達95％的豬在最初感染后兩個至三個月內可能變成血清陽性。即使感染已經穩定化，也存在通過排菌幼小雌豬散布的PRRSV將感染妊娠母豬及再次發生繁殖問題的強烈可能性。PRRS對豬飼養畜群的經濟影響相當大。

引起神秘豬疾病且首先在荷蘭被分離出來的PRRSV稱為萊利斯塔德病毒(Lelystad?virus)(LV)(溫斯伍特(G.Wesvoort)等人，獸醫季刊(Vet.Quarterly)3：121-130(1991))。其后不久，在西班牙發現不同的Olot分離株(普拉納(Plana)等人，獸醫微生物學(Vet.Microbio1.)，33：203.211，1992)。隨后，PRRSV的新穎分離株在若干公開案中予以闡述(參見，例如，歐洲專利申請案第0529584A2號、WO?93/06211及WO?93/07898)。

其它公開案揭示PRRS病毒分離株的結構特征，例如全部萊利斯塔德病毒(LV)基因組(蒙勒伯格(J.J.M.Meulenberg)等人，“豬流行性流產及呼吸綜合癥(PEARS)的致病因子萊利斯塔德病毒與LDV及EAV有關(Lelystad?virus，the?causative?agent?ofporcine?epidemic?abortion?and?respiratory?syndrome，is?related?to?LDV?and?EAV)”，病毒學(Virology)192：62-72(1993))；圖賓根(Tubingen)(德國)PRRS病毒分離株(TV)基因組的區段(考再曼(K-K.Cozelmann)等人，“動脈病毒屬成員豬繁殖與呼吸綜合癥病毒的分子表征(Molecular?characterization?of?porcine?reproductive?and?respiratorysyndrome?virus，a?member?of?the?Arterivirus?group)”，病毒學193：329-339(1993))及允許基因克隆及測序的其它分離株。

通常，動脈病毒的病毒粒子直徑為50-70nm且含有同質異構(很可能為二十面體)核衣殼，所述同質異構核衣殼的直徑為35nm，由緊密粘附的包膜圍繞且具有蜂巢狀表面結構。基因組由單個線性正義ssRNA分子(尺寸為13-15kb)組成。PRRS病毒的尺寸為50-60nm，在核衣殼內含有約30-35nm的包膜及單個RNA分子。PRRSV的基因組RNA約為15kb(15000個堿基對)。所述基因組編碼RNA復制酶(ORF1a及ORF1b)、糖蛋白GP2至GP5、整合膜蛋白M及核衣殼蛋白N(ORF?2至7)。基因組RNA是經由全長反義復制中間體合成。