[發明專利]作為細胞內Icrac活性基礎的蛋白質的功能鑒定

有效

• 申請號: 200880017095.0
• 申請日: 2008-03-21
• 公開（公告）號: CN101730846A
• 公開（公告）日: 2010-06-09
• 發明（設計）人: 萊因霍爾德·彭納;安德烈亞·弗萊格
• 申請（專利權）人: 皇后醫學中心
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 羅天樂

1.一種用于確定CRACM3對細胞的Icrac活性的貢獻的測定法，所述測定 法包括(a)在≥50μM的2-氨基乙氧基二苯基硼酸(2-APB)濃度測量所述細胞 的Icrac活性，其中所述Icrac活性的增強表明CRACM3對所述Icrac活性有 貢獻。

2.權利要求1的測定法，還包括(b)在≤5μM2-APB的濃度和≥10μM2-APB 的濃度測量所述細胞的Icrac活性，其中Icrac電流在≤5μM2-APB的增強以 及在≥10μM2-APB存在下的抑制表明CRACM1對所述Icrac活性有貢獻。

3.權利要求2的測定法，還包括(c)在50μM2-APB濃度測量所述細胞的 Icrac活性，其中CRACM2電流幅值40％至50％的減少表明CRACM2對所 述Icrac的貢獻。

4.權利要求3的測定法，其中所述步驟(a)的對所述Icrac活性的測量選自下 組：測量Icrac失活動力學、Icrac激活動力學、以及所述細胞的鈣內流；且 所述步驟(b)的對所述Icrac活性的測量選自下組：測量Icrac失活動力學、Icrac 激活動力學、以及所述細胞的Icrac鈣內流；且所述步驟(c)的對所述Icrac 活性的測量選自下組：測量Icrac失活動力學、Icrac激活動力學、以及所述 細胞的Icrac鈣內流。

5.權利要求1，2或3的測定法，其中所述細胞是穩定表達STIM1并瞬時過 表達所述CRACM3的HEK293細胞。

6.一種用于確定CRACM3對細胞的Icrac活性的貢獻的測定法，所述測定 法包括(a)在≥50μM的2-氨基乙氧基二苯基硼酸(2-APB)濃度測量所述細胞 的Icrac電流，其中所述Icrac電流的增強表明CRACM3對所述Icrac活性有 貢獻。

7.權利要求6的測定法，還包括(b)在≤5μM2-APB的濃度和≥10μM2-APB 的濃度測量所述細胞的Icrac活性，其中Icrac電流在≤5μM2-APB的增強以 及在≥10μM2-APB存在下的抑制表明CRACM1對所述Icrac活性有貢獻。

8.權利要求7的測定法，還包括(c)在50μM2-APB濃度測量所述細胞的 Icrac活性，其中CRACM2電流幅值40％至50％的減少表明CRACM2對所 述Icrac的貢獻。

9.權利要求8的測定法，其中所述步驟(a)的對所述細胞的Icrac活性的所述 測量選自下組：測量Icrac失活動力學、Icrac激活動力學、以及所述細胞的 鈣內流；且所述步驟(b)的對所述細胞的Icrac活性的所述測量選自下組：測 量Icrac失活動力學、Icrac激活動力學、以及所述細胞的Icrac鈣內流。

10.權利要求6，7或8中任一項的測定法，其中所述細胞是穩定表達STIM1 并瞬時過表達所述CRACM3的HEK293細胞。