[發明專利]基于微滴的過氧化氫測定

有效

• 申請號: 200880007205.5
• 申請日: 2008-03-05
• 公開（公告）號: CN101663403A
• 公開（公告）日: 2010-03-03
• 發明（設計）人: 艾倫·E·艾克哈特
• 申請（專利權）人: 先進流體邏輯公司
• 主分類號: C12Q1/00
• 分類號: C12Q1/00
• 代理公司: 北京中原華和知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 壽 寧

授權信息

本發明依據美國國家衛生研究院授予的DK066956-02和GM072155-02 受到政府支持。美國政府對本發明擁有部分權力

相關申請

除了本申請引用的專利申請以外，本專利申請還與下列申請相關，并 主張其優先權：2007年3月5日遞交的美國臨時專利申請第60/892,971號， 名稱為“基于過氧化氫微滴的測定”，和2007年10月16日遞交的美國 臨時專利申請第60/980,186，名稱為“基于過氧化氫微滴的測定”，其 全部內容作為參考并入本申請。

技術領域

本發明總體上涉及改進的過氧化氫測定領域。本發明特別涉及基于微 滴的過氧化氫測定，以及用來進行這些測定的微滴執行機構。

背景技術

很多種測定都使用過氧化氫作為媒介物對目標分子進行間接分析。例 如，對葡萄糖進行測量時，可利用葡萄糖氧化酶產生過氧化氫，并利用過 氧化氫和過氧化物酶將一底物氧化，產生可檢測到的信號，例如顏色變化。 適合的可氧化底物包括Amplex?Red(Invitrogen公司生產)和 PS-ATTO(Lumigen公司生產)。本領域存在將過氧化氫分析小型化和/或加速 的需要。

微滴執行機構被用來進行多種微滴操作。微滴執行機構通常包括一基 板，并關聯多個電極以便在基板的微滴操作表面上進行微滴操作。微滴執 行機構還可具有頂板，一般將頂板與微滴操作表面平行設置并隔開，形成 一個間隙，微滴操作就發生在該間隙中。間隙內可充滿填充液，填充液不 與微滴執行機構上被操作的流體相融。有必要擴展微滴執行機構的能力， 使其能夠進行基于過氧化氫測定。

發明內容

本發明提供一種改進的過氧化氫測定，以及用來進行這種測定的微滴 執行機構。本發明的微滴執行機構可進行基于微滴的過氧化氫測定。

在一個實施例中，提供了一種通過過氧化氫測定對分析物進行檢測的 方法。該方法包括以下步驟：將過氧化氫測定試劑和樣品結合到一微滴中， 該微滴的體積在大約1nL至10μL之間，并在微滴中進行測定，產生可 檢測的信號。

在另一實施例中，提供了一種進行過氧化氫測定的方法，包括以下步 驟：將過氧化氫測定試劑和樣品結合到一微滴中，并在微滴中進行測定， 產生可檢測的信號，該測定產生一個基本上為線性的結果。

在另一實施例中，提供了一種進行過氧化氫測定的方法，包括以下步 驟：將過氧化氫測定試劑和樣品結合到一微滴中，并在微滴中進行測定， 產生可檢測的信號，其中，基本上所有的分析物都被消耗；對該信號進行 檢測；對該信號進行分析，確定分析物在樣品中的量。

在另一實施例中，提供了一種利用單一檢測器在單一微滴執行機構上 檢測多個分析物的方法。該方法包括以下步驟：提供一微滴執行機構裝置， 該微滴執行機構裝置包括一基板，該基板上關聯了多個用來在基板的微滴 操作表面上進行微滴操作的多個電極，以及一個或多個與微滴操作表面連 通的儲槽，包括一種或多種用來進行測定的試劑，其中過氧化氫是中間物。

該方法還包括以下步驟：利用微滴操作將多個樣品微滴與多個試劑結 合，在單一微滴執行機構上進行多個過氧化氫測定。

定義

以下在本說明書中使用的術語具有如下含義。

“啟動”指一個或多個電極結構使一個或多個電極的電氣狀態發生變 化，并且導致一個微滴操作的產生。

“微滴”指微滴執行機構上具有一定體積的流體，它至少部分地被填充 液約束。例如，微滴可以完全被填充液包繞或是被填充液和微滴執行機構 的一個或多個表面約束。微滴的形狀可以是多種多樣的，非限定的例子大 致包括：碟形、彈頭形、截球形、橢圓形、球形、部分被壓扁的形狀、半 球形、卵形、圓柱形、以及微滴操作期間形成的各種形狀，例如融合或分 離或是該形狀與微滴執行機構的一個或多個表面接觸時產生的形狀。