[發明專利]一種定量檢測乙型肝炎病毒特異性細胞毒性T淋巴細胞的方法

有效

• 申請號: 200810243725.8
• 申請日: 2008-12-12
• 公開（公告）號: CN101424692A
• 公開（公告）日: 2009-05-06
• 發明（設計）人: 李軍;黃祖瑚;韓亞萍;劉源;邢益平;萬玉峰;孔練花;周東輝;盧山
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學第一附屬醫院
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/576
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司
• 代理人: 徐冬濤;劉成群

技術領域

本發明屬于免疫檢測領域，屬于一種利用主要組織相容性復合物(major histocompatibility?complex，MHC)-抗原肽五聚體(Pentamer)技術檢測乙型肝炎病毒 (HBV)特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTL)的方法。

背景技術

我國是HBV感染的高流行區，慢性HBV感染與肝硬化、原發性肝癌的發生有密切 關系，但迄今尚無徹底清除乙型肝炎病毒和治愈慢性乙型肝炎(chronical?hepatitis B，CHB)的藥物和方法。造成慢性HBV持續感染的機制，國內外研究公認的最重要的 因素是機體缺乏多克隆、強有力的抗HBV特異性CTL免疫應答反應。HBV感染者產 生多克隆特異性的CTL應答是清除病毒，尤其是清除肝細胞內病毒最重要的機制。HBV 感染后不同個體的免疫學應答模式不同，其臨床轉歸也不同(Thio?CL，Thomas DL，Karacki?P，et?al.Comprehensive?analysis?of?classI?and?class?II?HLA?antigens?and chronic?hepatitis?B?virus?infection.J?Virol，2003，77：2083-12087.)，這是宿主的HLA等免 疫遺傳背景和HBV自身特性共同作用的結果。

人類MHC首先發現在白細胞表面，故稱其為人白細胞相關抗原(HLA)，編碼HLA 的基因群稱為HLA復合體。HLA是人體最復雜的遺傳多態性系統，有幾十個基因座 位，每個基因座位又有幾十個等位基因。它能夠獨特地結合細胞內多肽并呈遞至細胞表 面，進而激活T淋巴細胞，由此形成T細胞對抗原肽和MHC分子的雙重識別，其意義 是使T細胞受體(TCR)只能識別自身MHC分子遞呈的抗原，與特異性CTL密切相關 的主要是HLA-A類基因，CTL通過識別HLA-I類分子遞呈的HBV抗原表位識別靶 細胞，HLA-I類基因的型別和HBV抗原的序列特點，共同決定某一宿主的抗原遞呈細 胞將誘導的HBV特異性CTL應答類型。不同HLA-I等位型的個體可以有不同的抗原 表位，與抗原肽結合的頻率亦不同。金士正等(金士正，吳國光，藍欲曉，等.廣東漢族人群 人類白細胞抗原-A，B及DRB1基因多態性和單倍型分布.廣東醫學，2006，27：11.)在 2001～2004年8月之間，對3275名廣東漢族登記加入中國造血干細胞捐獻者進行HLA 分型，發現人群中最常見的HLA-A基因是HLA-A11、A2、A24和A33，分布率分別為 32.1％、31.9％、14.2％和11.4％。HLA-A2和A24在我國江蘇地區基因頻率達分別高 達50.87％和30.56％(梁文飚，薛敏，潘芹芹，等.中華(江蘇)骨髓庫人群HLA- I類抗原的PCR-SSP分型.中國輸血雜志，2005，3：199-201.)。