[發明專利]一種用于檢測菊花褪綠斑駁類病毒的方法

無效

• 申請號: 200810240414.6
• 申請日: 2008-12-19
• 公開（公告）號: CN101451164A
• 公開（公告）日: 2009-06-10
• 發明（設計）人: 王永勤;黃叢林;吳忠義;張秀海;李春華;梁宏霞;劉佳
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68
• 代理公司: 北京國林貿知識產權代理有限公司
• 代理人: 孔祥玲;李桂玲

1.一種用于檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：該方法利用環介導等溫擴增反應(LAMP)檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)。

2.根據權利要求1所述的檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：該方法包括的步驟依次為：

A.配制反應體系；

B.將所述的反應體系進行溫育處理，得到溫育產物；該溫育處理的溫度為65℃，時間為30-80min；

C.將所述的溫育產物進行滅活處理，得到滅活產物；該滅活處理的溫度為80℃，時間為5-15min；

D.將所述的滅活產物進行檢測，得到檢測結果。

3.根據權利要求2所述的檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：所述的反應體系中包括：

Betaine???0.6-1.4mol/L，

dNTP??????0.25-2.0mmol/L，

Mg²⁺??????2-10mmol/L，

外引物，內引物；所述的內引物和外引物的濃度之比為1：1-1：8。

4.根據權利要求2所述的檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：所述的反應體系中包括：

Betaine??0.6mol/L，

dNTP?????0.4mmol/L，

Mg²⁺?????2mmol/L，

外引物，內引物；所述的內引物和外引物的濃度之比為1：1。

5.根據權利要求2所述的檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：所述的反應體系中包括：

Betaine??1.0mol/L，

dNTP?????1.5mmol/L，

Mg²⁺?????5mmol/L，

外引物，內引物；所述的內引物和外引物的濃度之比為1：4。

6.根據權利要求2所述的檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：所述的反應體系中包括：

Betaine??1.2mol/L，

dNTP?????2.0mmol/L，

Mg²⁺?????10mmol/L，

外引物，內引物；所述的內引物和外引物的濃度之比為1：8。

7.根據權利要求3所述的檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：所述的外引物的核苷酸序列為：

5’-CCCACTTCAGGTCTCG-3’，

5’-GAGAGCGAACCGACTG-3’。

8.根據權利要求3所述的檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：所述的內引物的核苷酸序列為：

5’-CGGGGTGGGACGGAGGAACTTCCCCTCTAAGC-3’，

5’-GGTCCTTTGGAGTCCACCTTCTCCGAGGAGAA-3’。

9.根據權利要求1所述的檢測菊花褪綠斑駁類病毒(CChMVd)的方法，其特征在于：該方法適用的菊花品種為：粉地毯，神馬。