[發(fā)明專(zhuān)利]同型半胱氨酸診斷/測(cè)定試劑(盒)及同型半胱氨酸濃度測(cè)定方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810235630.1
• 申請(qǐng)日: 2008-12-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101750304A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王爾中
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 蘇州艾杰生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/31
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/31;G01N21/17;G01N33/48;C12Q1/26
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種利用酶比色法及酶聯(lián)法技術(shù)的同型半胱氨酸濃度測(cè)定方法，其方法如下：

同型半胱氨酸+5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸

甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶

????????????????????????????????????????四氫蝶酰三谷氨酸+蛋氨酸

蛋氨酸+水蛋氨酸γ-裂解酶甲硫醇+氨+2-氧代丁酸

氨+(吲哚-3-基)丙酮酸+還原型輔酶色氨酸脫氫酶色氨酸+輔酶

將最終反應(yīng)物置于紫外/可見(jiàn)光分析儀或半、全自動(dòng)生化分析儀下，檢測(cè)主波長(zhǎng)340nm吸光度下降的程度，測(cè)算出同型半胱氨酸的濃度大小測(cè)定結(jié)果。

2.一種同型半胱氨酸診斷/測(cè)定試劑(盒)，主要成分包括：

緩沖液????????????????????20——500mmol/L

穩(wěn)定劑????????????????????1——4000mmol/L

還原型輔酶????????????????0.1——0.35mmol/L

甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶

??????????????????????????1000——80000U/L

蛋氨酸γ-裂解酶???????????1000——80000U/L

色氨酸脫氫酶??????????????1000——80000U/L

5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸????1——50mmol/L

(吲哚-3-基)丙酮酸?????????1——50mmol/L

試劑成分的濃度不一定只限于上述范圍；在此范圍內(nèi)效果較好，在此范圍外，試劑仍會(huì)反應(yīng)作用。

其特征在于：試劑(盒)可以是干粉狀態(tài)，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液體試劑，直接使用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述同型半胱氨酸診斷/測(cè)定試劑(盒)，其特征在于：

由緩沖液、穩(wěn)定劑、還原型輔酶、甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶、蛋氨酸γ-裂解酶、色氨酸脫氫酶、5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸、(吲哚-3-基)丙酮酸組成單劑試劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述同型半胱氨酸診斷/測(cè)定試劑(盒)，其特征在于：由緩沖液、穩(wěn)定劑、還原型輔酶、甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶、蛋氨酸γ-裂解酶、色氨酸脫氫酶、5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸、(吲哚-3-基)丙酮酸組成雙劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩(wěn)定劑、還原型輔酶、5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸、(吲哚-3-基)丙酮酸組成；試劑2，由緩沖液、穩(wěn)定劑、甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶、蛋氨酸γ-裂解酶、色氨酸脫氫酶組成。還原型輔酶、甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶、蛋氨酸γ-裂解酶、色氨酸脫氫酶、5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸、(吲哚-3-基)丙酮酸在試劑1或試劑2中的位置可以不限。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述同型半胱氨酸診斷/測(cè)定試劑(盒)，其特征在于：

由緩沖液、穩(wěn)定劑、還原型輔酶、甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶、蛋氨酸γ-裂解酶、色氨酸脫氫酶、5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸、(吲哚-3-基)丙酮酸組成多劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩(wěn)定劑、還原型輔酶、5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸、(吲哚-3-基)丙酮酸組成；試劑2，由緩沖液、穩(wěn)定劑、蛋氨酸γ-裂解酶、色氨酸脫氫酶組成；試劑3，由緩沖液、穩(wěn)定劑、甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶組成。還原型輔酶、甲基四氫蝶酰三谷氨酸-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶、蛋氨酸γ-裂解酶、色氨酸脫氫酶、5-甲基四氫蝶酰三谷氨酸、(吲哚-3-基)丙酮酸在試劑1、試劑2或試劑3中的位置可以不限。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述同型半胱氨酸診斷/測(cè)定試劑(盒)，其特征在于：還包括穩(wěn)定劑1-4000mmol/L或0.1％-100％體積比。所述穩(wěn)定劑為：甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene?Glycol)、乙二醇(Ethylene?glycol)及防腐劑中的至少一種。