[發明專利]月季耐鹽株系的離體快速篩選方法

無效

• 申請號: 200810233663.2
• 申請日: 2008-12-01
• 公開（公告）號: CN101422132A
• 公開（公告）日: 2009-05-06
• 發明（設計）人: 瞿素萍;王繼華;唐開學;張顥;王麗花;蘇艷
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: A01H1/04
• 分類號: A01H1/04;A01H1/06;A01H4/00;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司
• 代理人: 康 珉

技術領域

本發明屬于農業生物技術領域，具體涉及月季耐鹽株系的離體篩選與快速增殖的方法。

背景技術

月季(Rosa?cvs.)是世界花卉市場上最重要的切花種類之一。在荷蘭切花拍賣額中，月季連續多年排名第一，居世界四大切花之首，同時月季也是我國乃至云南省的第一大切花，是切花種類中的重中之重，創造出巨大的經濟效益。但在月季的栽培和生產過程中，耐鹽性已成為制約切花月季品質和產量提升的關鍵因素之一，且當前切花月季的栽培模式多為設施栽培，在連作模式下的生產，造成溫室土壤鹽分積累逐年遞增，使月季在高鹽基質下的產量降低，影響了豐產性。

前人的研究表明培育耐鹽品種是解決土壤鹽漬化問題的關鍵。常規耐鹽性篩選常采用幼苗或植株等材料進行田間篩選，使經物理或化學等誘變后的組培無性系再經長期增殖、生根、移栽成活后形成一定數量的幼苗后，才能進行田間篩選；若篩選出耐鹽突變株則還需再通過組培、扦插或嫁接等方式進行擴繁，存在時間周期長，不利耐鹽突變株系的快速篩選及大量增殖，加之土地和勞動力成本較高，需耗費更多的人力與物力。

目前，耐鹽品種培育的新技術方面常有：(1)體細胞無性系的變異及篩選：在組織培養過程中，由于培養條件的變化，如植物激素、添加甲基磺酸乙酯等化學誘變劑、射線處理等物理誘變等方法使植物體產生突變。例如：中國專利，專利號為ZL0311539.8的“番茄耐鹽性狀的篩選”，中國專利，專利申請號為200610118700.6的“一種利用組織培養篩選耐鹽番茄的方法”，中國專利，專利號為ZL03150784.0的“耐鹽性番茄植株培育方法”，均是將材料在含有不同濃度NaCl的培養基中培養，選擇出抗鹽的變異植株。(2)組織培養結合射線輻照處理誘發突變體：如鄭海柔等，“酸棗組織培養結合⁶⁰Co-γ射線輻照誘發突變體”，上海農業學報，2004，20(1)：13-18。王磊的“豐花月季組培苗輻射誘變研究及遺傳變異研究”，東北農業大學碩士畢業論文，2007。

現有技術存在以下缺陷：(1)在體細胞無性系的變異及篩選中還沒有對切花月季這一大花卉種類進行耐鹽株系的離體快速篩選研究，如上述專利。(2)在組織培養結合射線輻照處理誘發突變體研究中，如王磊的“豐花月季組培苗輻射誘變研究及遺傳變異研究”(東北農業大學碩士畢業論文，2007)，重點是用組織培養材料在輻射劑量的研究和利用RAPD技術在早期對月季輻射后代進行鑒定和選擇研究上，并未利用組織培養技術對月季輻射后代的耐鹽篩選進行研究。鄭海柔等的“酸棗組織培養結合⁶⁰Co-γ射線輻照誘發突變體”(上海農業學報，2004，20(1)：13-18)中除所選作物不同外，在組織培養結合⁶⁰Co-γ射線輻照誘發突變體中也未有針對性地進行耐鹽株系的篩選。

目前，將⁶⁰Co-γ射線等物理誘變與耐鹽選擇壓力結合進行月季耐鹽株系離體篩選的研究還未見報道，將⁶⁰Co-γ射線等物理誘變與耐鹽選擇壓力結合對月季耐鹽株系的離體快速篩選的研究也還未見報道。

發明內容

本發明的目的是解決月季品種選育周期長，雜交選育2年才能開花以及田間耐鹽性篩選易造成土壤鹽滯化的問題，提供一種月季耐鹽株系的離體快速篩選方法。

本發明克服了現有技術中(1)傳統月季耐鹽品種篩選中土地和勞動力成本較高、周期較長的局限；(2)在已報道的耐鹽性篩選技術中還沒有針對月季的方法，而其它作物耐鹽選擇壓力的濃度并不適應于月季種類；(3)在組織培養結合輻照處理誘發突變體的研究中，存在未利用組培的離體篩選技術對月季輻射后代的耐鹽篩選進行研究等缺陷。因此，本發明在利用成熟組織培養技術的基礎上，創新地將⁶⁰Co-γ射線物理誘變與⁶⁰Co-γ射線物理誘變之前的組織培養技術和⁶⁰Co-γ射線誘變之后的耐鹽選擇壓力有機結合，以對月季耐鹽株系進行離體篩選，重點研究了耐鹽突變株系的離體篩選、繼代增殖、壯苗、生根、移栽等關鍵技術，本發明通過多年的探索，成功地研究出在短時間內可獲得一定數量的變異植株，適合于選育周期長的木本花卉如月季耐鹽株系的離體快速篩選，成功建立起月季耐鹽株系的離體快速篩選方法，以滿足月季產業化應用及可持續發展的需求。本發明各步驟的效果好，各步驟之間具有系統性、整體性，大幅提高了變異率，為月季耐鹽新品種的選育提供了一種新的思路和方法。

本發明與現有技術相比，有以下有益效果：