[發(fā)明專利]一種中和CYR61的單克隆抗體(雜交瘤)及其應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810207273.8
• 申請(qǐng)日: 2008-12-18
• 公開（公告）號(hào): CN101747435A
• 公開（公告）日: 2010-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李寧麗;沈佰華;王利;黃立東
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海市免疫學(xué)研究所
• 主分類號(hào): C07K16/18
• 分類號(hào): C07K16/18;C12N5/20;A61K39/395;A61P19/02;A61P29/00
• 代理公司: 上海衡方知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31234
• 代理人: 卞孜真;胡美珍

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及一種單克隆抗體，尤其涉及一種能夠中和CYR61的單克隆抗體及其應(yīng)用和能產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤。?

【背景技術(shù)】

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid?arthritis，RA)是最常見的風(fēng)濕性疾病之一。RA是一種最常見的自身免疫病。全球RA患病率平均為0.5-1％。在我國(guó)，RA患病率為0.45％，而且每年的新增患病總?cè)思s為400萬左右。RA的發(fā)病多為青壯年，由于沒有特異性治療藥物控制疾病發(fā)展，大部分患者在發(fā)病的6-10年左右即由于致殘而失去勞動(dòng)能力，未經(jīng)治療的患者，其2年和3年的致殘率可達(dá)50％和70％。因此，RA嚴(yán)重影響人民生命健康，同時(shí)也給我國(guó)正在發(fā)展健全的醫(yī)保事業(yè)帶來沉重負(fù)擔(dān)，在一定程度上阻礙我國(guó)和諧社會(huì)的建設(shè)進(jìn)程。?

RA的治療沒有特異性手段。目前的藥物治療及滑膜切除、關(guān)節(jié)置換等手術(shù)療法只能緩解炎癥和疼痛，而對(duì)軟骨和骨的侵襲性破壞無效。因此深入研究RA的發(fā)病機(jī)制，尋找新的治療靶點(diǎn)具有重要的理論和實(shí)際意義。雖然目前的抗TNF-a受體人源化抗體在抑制炎癥病變的形成上有較好臨床效果，但是該制劑對(duì)于中、晚期關(guān)節(jié)和滑膜已經(jīng)有明顯病變的患者效果不顯著，而且只在部分患者中有效。因此，研究發(fā)現(xiàn)直接刺激滑膜和軟骨病變的生物靶點(diǎn)、設(shè)計(jì)和發(fā)展針對(duì)這些生物靶點(diǎn)的干預(yù)手段極為重要。目前常用的干預(yù)手段有人源化單抗或者干擾SiRNA。但是，由于干擾SiRNA的長(zhǎng)期轉(zhuǎn)染技術(shù)至今不完善，目前仍不能用于體內(nèi)。而人源化抗體的制備技術(shù)目前已經(jīng)基本完善、國(guó)際上已經(jīng)有多種人源化抗體上市并用于疾病治療，均已獲得良好效果，因此，選擇有效生物靶點(diǎn)?采用人源化抗體進(jìn)行中和是特異性治療的重要途徑。?

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的是，提供一種單克隆抗體。?

本發(fā)明的再一的目的是，提供一種單克隆抗體的用途。?

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：一種由小鼠抗人CYR61單克隆抗體雜交瘤CGMCC?NO.2766或CGMCC?NO.2767分泌的單克隆抗體。?

所述分泌IgM的小鼠抗人CYR61單克隆抗體雜交瘤已保藏，保藏單位的名稱中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏單位的地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)大屯路，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。保藏日期：2008年11月25日。保藏編號(hào)CGMCC?NO.2766。所述分泌IgG的小鼠抗人CYR61單克隆抗體雜交瘤已保藏，保藏單位的名稱中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏單位的地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)大屯路，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。保藏日期：2008年11月25日。保藏編號(hào)CGMCC?NO.2767。?

為實(shí)現(xiàn)上述第二個(gè)目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：?jiǎn)慰寺】贵w在制備治療風(fēng)濕性疾病疾病藥物中的應(yīng)用。所述的風(fēng)濕性疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。?

依據(jù)上述技術(shù)方案，本發(fā)明的具體實(shí)施方法是：?

1、在基因芯片篩查的基礎(chǔ)上，運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR方法分析了CYR61在RA患者不同組織中的表達(dá)格局。發(fā)現(xiàn)CYR61主要表達(dá)在RA患者的滑膜組織中，其相對(duì)含量是RA患者外周血單個(gè)核細(xì)胞的8.7倍、是RA關(guān)節(jié)液?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞的13.3倍、正常人的外周血單個(gè)核細(xì)胞的125倍。同時(shí)用免疫組化的方法比較了RA、OA、正常人的滑膜組織中CYR61的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)CYR61在RA滑膜組織?中表達(dá)明顯高于OA患者和正常對(duì)照。進(jìn)一步采用體外培養(yǎng)RA滑膜組織來源的FLS進(jìn)行研究：用實(shí)時(shí)定量PCR發(fā)現(xiàn)CYR61在培養(yǎng)的FLS中表達(dá)高于滑膜組織；采用Western?Blot方法比較了培養(yǎng)的RA、OA、正常人的FLS中CYR61蛋白的表達(dá)格局，明確了CYR61在RA患者的成纖維樣滑膜細(xì)胞中的表達(dá)顯著高于OA和正常對(duì)照，提示CYR61在RA滑膜組織病變中可能發(fā)揮著重要的作用。?