[發(fā)明專利]一種誘導(dǎo)成體表皮細(xì)胞去分化的非轉(zhuǎn)基因方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810169475.8
• 申請(qǐng)日: 2008-10-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101724601A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付小兵;孫同柱;孫曉艷;蔡颯
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12N5/08
• 分類號(hào): C12N5/08
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種誘導(dǎo)成體表皮細(xì)胞去分化的非轉(zhuǎn)基因方法，包括以下步驟：

a)分離并培養(yǎng)表皮細(xì)胞，篩選具有α₆^dimCD71^bri表型的表皮細(xì)胞；

b)將步驟a)獲得的具有α₆^dimCD71^bri表型的表皮細(xì)胞進(jìn)行BrdU標(biāo)記；

c)將所述的BrdU標(biāo)記的表皮細(xì)胞進(jìn)行熱休克處理，熱休克處理溫度為 43℃，熱休克處理時(shí)間為1小時(shí)。

d)熱休克處理后的細(xì)胞在含生長(zhǎng)因子bFGF的培養(yǎng)基中繼續(xù)誘導(dǎo)，bFGF的 濃度為100ng/ml，bFGF繼續(xù)誘導(dǎo)時(shí)間為24小時(shí)。

e)更換新培養(yǎng)基，將誘導(dǎo)后的表皮細(xì)胞繼續(xù)孵育7天從而獲得去分化的表 皮干細(xì)胞。