[發明專利]原料藥材廣金錢草指紋圖譜測定方法

無效

• 申請號: 200810154310.3
• 申請日: 2008-12-22
• 公開（公告）號: CN101762643A
• 公開（公告）日: 2010-06-30
• 發明（設計）人: 王艷
• 申請（專利權）人: 天津天阜康生物技術發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G06F19/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明涉及中藥材指紋圖譜的構建方法，尤其是廣金錢草藥材高效液相色譜指紋圖譜的構建方法及其標準指紋圖譜。屬于藥物分析技術領域。

背景技術：

中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經適當處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標示其化學特征的色譜圖或光譜圖。

中藥指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，它是建立在中藥化學成分系統研究的基礎上，主要用于評價中藥材以及中藥制劑半成品質量的真實性、優良性和穩定性?！罢w性”和“模糊性”為其顯著特點。

目前，中藥指紋圖譜技術已涉及眾多方法，包括薄層掃描(TLCS)、高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)和高效毛細管電泳法(HPCE)等色譜法以及紫外光譜法(UV)、紅外光譜法(IR)、質譜法(MS)、核磁共振法(NMR)和X-射線衍射法等光譜法。其中色譜方法為主流方法，尤其是HPLC、TLCS和GC已成為公認的三種常規分析手段。由于HPLC具有分離效能高、選擇性高、檢測靈敏度高、分析速度快、應用范圍廣等特點；中藥成分絕大多數可在高效液相色譜儀上進行分析檢測，且積累較豐富的應用經驗。因此高效液相色譜法已成為中藥指紋圖譜技術的首選方法。隨著HPLC-MS和GC-MS等聯用技術的應用，中藥指紋圖譜技術更趨完善。

廣金錢草為豆科植物廣金錢草Desm?odium?styracifolium(Osb.)Merr.的干燥地上部分。始載于《嶺南草藥志》，為常用中藥。主產于我國廣東省，具有清熱除濕，利尿通淋之功效。用于治療各種淋證，水腫等疾病歷史悠久。含黃酮類，生物堿類，皂苷類，酚類等成分?！吨腥A人民共和國藥典》只收載了廣金錢草中黃酮，生物堿的檢查方法，且其混用品種數量繁多，為其制定質量可控的標準帶來了困難。

發明內容：

本發明的目的是提供一種廣金錢草藥材指紋圖譜的構建方法，以及由此方法所得到的廣金錢草藥材標準指紋圖譜。為實現此目的，本發明通過對廣金錢草藥材高效液相色譜指紋圖譜的研究，提出了一種較好的廣金錢草藥材質量控制方法，彌補了現有質量控制技術的不足，使廣金錢草藥材的質量控制更加完善和科學。

本發明的廣金錢草藥材高效液相色譜指紋圖譜的構建方法，包括如下步驟：

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈(A)-水(B)-甲醇(C)為流動相梯度洗脫：0～10min(10％A～85％B～5％C)，20min(10％A～82％B～8％C)，30min(12％A～80％B～8％C)，60min(17％A～75％B～8％C)。流速1.0mL/min，柱溫25℃，檢測波長272nm。

內標物溶液的制備：取蘆丁對照品適量，用60％甲醇制成每1mL含1.2524mg的溶液。

供試品溶液的制備：取廣金錢草藥材粉末適量精密稱定，置于錐形瓶中，精密加入60％甲醇溶液適量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用60％甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，制成50mg/ml的溶液，濾過，取續濾液3mL于5mL量瓶中，精密加入內標物溶液1mL，加60％的甲醇至刻度，即得。

測定方法：分別精密吸取供試品溶液20μL，注入液相色譜儀，記錄60min色譜圖，將供試品溶液的指紋圖譜與對照品共有模式圖譜經計算機輔助相似度評價軟件比較。