[發(fā)明專利]防治蔬菜土傳病害的AR156合劑

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810088388.X
• 申請(qǐng)日: 2008-04-03
• 公開（公告）號(hào): CN101273724A
• 公開（公告）日: 2008-10-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉紅霞;李師默;郭堅(jiān)華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)資產(chǎn)經(jīng)營(yíng)有限公司
• 主分類號(hào): A01N63/00
• 分類號(hào): A01N63/00;A01P3/00;A01P5/00
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 張素卿

一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種防治蔬菜土傳病害的復(fù)合生防菌劑AR156合劑，屬于農(nóng)作物防病治病技術(shù)領(lǐng)域，專用于多種蔬菜土傳病害的無公害防治。

二、技術(shù)背景

植物土傳病害多為土壤習(xí)居菌，如引起茄科作物青枯病的Ralstonia?solanacearium，引起多種植物枯、黃萎病的Fusarium?oxysporium，Verticillium?dahlaei，以及近年來在各地危害越來越嚴(yán)重的根結(jié)線蟲病害(Meloidogyne?spp.)等。茄科作物青枯病屬世界性病害，病原細(xì)菌可侵染50多科200多種植物，全球范圍內(nèi)造成的經(jīng)濟(jì)損失多達(dá)120億美元；辣椒疫病Phytophathora?chili在我國(guó)蔬菜生產(chǎn)上常年造成巨大損失；根結(jié)線蟲(Meloidogyne?spp.)侵染保護(hù)地蔬菜，致使寄主常年減產(chǎn)15-25％，有時(shí)達(dá)70％以上，嚴(yán)重地制約了蔬菜的生產(chǎn)和出口創(chuàng)匯，有的甚至到了無法種植的地步。據(jù)估計(jì)，我國(guó)農(nóng)作物的生產(chǎn)每年因土傳病害而遭受的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)數(shù)十億元以上。而生產(chǎn)上，這些病害往往同時(shí)發(fā)生，如番茄大棚土壤中根結(jié)線蟲和細(xì)菌性青枯、真菌性枯萎、黃萎同時(shí)發(fā)生復(fù)合侵染，造成的損失非常嚴(yán)重。

這些土傳病害都有寄主范圍廣、抗逆性強(qiáng)、難以根除等特點(diǎn)，對(duì)復(fù)合侵染防治尤其困難。生產(chǎn)中往往既缺乏優(yōu)良的抗病品種，又缺乏有效的化學(xué)防治藥劑。而過多施用化學(xué)農(nóng)藥會(huì)帶來一系列生態(tài)和社會(huì)問題，如病蟲草產(chǎn)生的抗性，對(duì)非靶標(biāo)生物的直接危害，對(duì)土壤、水、大氣的污染，生物富集作用對(duì)人健康的影響，國(guó)際貿(mào)易對(duì)農(nóng)藥殘留農(nóng)產(chǎn)品的限制等。早在1992年世界環(huán)境與發(fā)展大會(huì)就要求“在全球范圍內(nèi)控制化學(xué)農(nóng)藥的銷售和使用”，不能過份依賴化學(xué)農(nóng)藥已成為人類的共識(shí)。

研究與開發(fā)生防制劑，利用生防細(xì)菌和PGPR細(xì)菌是一種比較有效的防治手段，通過空間位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)和營(yíng)養(yǎng)的競(jìng)爭(zhēng)，直接分泌胞外酶降解作用，產(chǎn)生抗生素抑制病原，誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性等機(jī)制，既可以減少化學(xué)農(nóng)藥使用帶來的環(huán)境污染，提高農(nóng)產(chǎn)品的價(jià)值，又可以改善土壤微生態(tài)環(huán)境，壓低有害生物的種群數(shù)量，利于農(nóng)作物的可持續(xù)生產(chǎn)，為我國(guó)無公害綠色蔬菜的生產(chǎn)提供有力保障。現(xiàn)有技術(shù)中按照本實(shí)驗(yàn)室的菌體保藏液專利(公開專利號(hào)CN1358838，公開日：2002年7月17日)方法，菌體可室溫保存2～3年。

三、發(fā)明內(nèi)容

技術(shù)問題：

本發(fā)明的目的是針對(duì)當(dāng)前防治植物土傳病害使用的化學(xué)農(nóng)藥污染嚴(yán)重、使用成本過高的缺陷，并且現(xiàn)有技術(shù)中的對(duì)多種植物土傳病害沒有同時(shí)具有較高防效的生防制劑，開發(fā)一種防治多種蔬菜土傳病害的復(fù)合生防菌劑，該菌劑的防效可達(dá)45％以上，并且有顯著的促生作用。

技術(shù)方案

本發(fā)明為一種防治多種蔬菜土傳病害的復(fù)合生防菌劑AR156合劑，含三種細(xì)菌成分：分別是菌株AR156，為芽孢桿菌屬(Bacillus?sp.)于2007年01月26日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，菌種保藏號(hào)為CGMCC?NO.1929；菌株XY21為沙雷氏菌屬(Serratia?sp.)，于2007年05月24日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，菌種保藏號(hào)為CGMCC?NO.2059；菌株SM21屬芽孢桿菌屬(Bacillus?sp.)，于2007年05月24日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，菌種保藏號(hào)為CGMCC?NO.2058。

復(fù)合生防菌劑AR156合劑的制備方法為：

1)將以上所述的三種菌株接種到PDA培養(yǎng)液中分別培養(yǎng)37℃180rpm，16～20小時(shí)后在超凈工作臺(tái)中分別取樣測(cè)600nm處的OD值，測(cè)定過程中以未接菌的培養(yǎng)液來調(diào)零；

2)當(dāng)培養(yǎng)至OD值在0.5～0.8之間時(shí)，將種子菌液以1∶100體積比加入PDA培養(yǎng)液中，30℃180rpm振蕩培養(yǎng)20～24小時(shí)，然后4000g離心10min，每1000ml培養(yǎng)液獲得13～16g濕菌，每克濕菌含4×10¹⁰～10¹⁵個(gè)菌體；

3)取濕菌與菌體保藏液(公開專利號(hào)CN1358838，公開日：2002年7月17日)按1g∶40ml配成三種細(xì)菌單劑，再將三種細(xì)菌單劑按1∶1∶1混合均勻，即得復(fù)合生防菌劑，成品中活菌總濃度為1×10⁹～1×10¹²cfu/ml，用于防治蔬菜土傳病害。