[發(fā)明專利]南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810086379.7
• 申請日: 2008-03-24
• 公開（公告）號: CN101245360A
• 公開（公告）日: 2008-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉浩元;李曉濱;詹周榮
• 申請（專利權(quán)）人: 江西德宇集團(tuán)
• 主分類號: C12P17/02
• 分類號: C12P17/02;C12R1/645
• 代理公司: 景德鎮(zhèn)市高嶺專利事務(wù)所
• 代理人: 程雷

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于從植物中提取活性成分技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝。

背景技術(shù)

紫杉醇具有良好的抗癌活性，尤其對晚期、轉(zhuǎn)移性卵巢癌、乳腺癌、肺癌有十分顯著的療效，對宮頸癌、食管癌、胃癌、膀胱癌、惡性黑色素瘤、惡性淋巴瘤亦有療效。目前提取紅豆杉紫杉醇的技術(shù)主要有化學(xué)法(包括溶劑浸泡、酸降解、堿降解等方法。這類方法的缺點(diǎn)是往往導(dǎo)致有效成分變性，產(chǎn)品中的有害殘留較高且難以去除)、物理法(使用低溫、冷凍(脆化)、超聲波、微波等物理作用破壞靈芝孢子壁，缺點(diǎn)是有效物質(zhì)很難提取充分，且設(shè)備昂貴)、機(jī)械法(通過碾壓、擠壓、噴射粉碎、氣流粉碎、撞擊等機(jī)械作用破壞細(xì)胞壁，缺點(diǎn)同物理法一樣，但設(shè)備造價(jià)較低)。

由于紅豆杉細(xì)胞組織中具有一層堅(jiān)硬的細(xì)胞壁外殼，且紫杉醇通常狀態(tài)下表現(xiàn)為脂溶性物質(zhì)，因此采用常規(guī)方法難以使植物細(xì)胞充分破壁，且必須使用有機(jī)溶劑，普遍存在提取時(shí)間長、收率低、產(chǎn)品含有機(jī)物殘留。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種南方紅豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工藝，該方法對紫杉醇提取充分、提取效率高、工藝簡單、成本低、無環(huán)境污染。

本發(fā)明的提取方法特征是以南方紅豆杉枝葉為原料，以類酵母菌的D426為酶解微生物，在32-36℃條件下進(jìn)行酶解，再經(jīng)過瞬間冷凍、高速分離、噴霧干燥，得到高含量紫杉醇。

上述酶解過程中的酶解微生物是以其活性菌體粉加入的，其制備方法為將類酵母菌的D426置于菌種培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)菌種，菌種培養(yǎng)基為肉湯瓊脂，而后由石臘油封存，3個(gè)月后再移植封存，加大培養(yǎng)基溶液，使其擴(kuò)群，然后取其浮生藻凍干成活性菌體粉。

本發(fā)明通過選用特定的微生物菌株對紅豆杉進(jìn)行酶解，使植物細(xì)胞充分破壁，并對其分子結(jié)構(gòu)中的憎水基進(jìn)行有效的包容，在不改變其他官能團(tuán)的前提下，使其具有親水性質(zhì)，因而能夠以水為溶劑在酶解后直接進(jìn)行提取，解決了分子破壁和憎水性的技術(shù)難題。與現(xiàn)有技術(shù)相比，一級提取率高達(dá)96％、無有機(jī)溶劑殘留、無環(huán)境污染。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤，經(jīng)打漿榨汁，摻入150克微生物活性菌體粉，攪拌均勻并在溫度為32℃條件下靜置5天，瞬間低溫濃縮至25公斤，然后經(jīng)過高速離心分離、噴霧干燥獲得粉狀干物質(zhì)755.6克，按照江西德宇集團(tuán)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(Q/JDY01-2007)方法，測得其紫杉醇的含量為1.63％。

實(shí)施例2

稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤，經(jīng)打漿榨汁，摻入150克微生物活性菌體粉，攪拌均勻并在溫度為34℃條件下靜置5天，瞬間低溫濃縮至25公斤，然后經(jīng)過高速離心分離、噴霧干燥獲得粉狀干物質(zhì)798.4克，按照江西德宇集團(tuán)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(Q/JDY01-2007)方法，測得其紫杉醇的含量為1.53％。

實(shí)施例3

稱取清洗后紅豆杉的枝葉1000公斤，經(jīng)打漿榨汁，摻入150克微生物活性菌體粉，攪拌均勻并在溫度為36℃條件下靜置5天，瞬間低溫濃縮至25公斤，然后經(jīng)過高速離心分離、噴霧干燥獲得粉狀干物質(zhì)853.6克，按照江西德宇集團(tuán)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(Q/JDY01-2007)方法，測得其紫杉醇的含量為1.42％。