[發明專利]乙酰異戊酰泰樂菌素提取方法

無效

• 申請號: 200810084607.7
• 申請日: 2008-03-13
• 公開（公告）號: CN101531693A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發明（設計）人: 潘貞德;孫玉勝;馬蘭;戴曉曦;王玉萬
• 申請（專利權）人: 邁德金生物技術（北京）有限公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06;C12P19/62
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技術領域

本發明涉及抗生素提取技術。是一種用鹽析法提取乙酰異戊酰泰樂菌素的新方法，該方法是向含乙酰異戊酰泰樂菌素的生物轉化濾液中或含乙酰異戊酰泰樂菌素的含水液體中加入氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀或硫酸銨，使乙酰異戊酰泰樂菌素從生物轉化濾液中或從含乙酰異戊酰泰樂菌素的含水液體中析出，通過固液分離，獲得乙酰異戊酰泰樂菌素。

背景技術

乙酰異戊酰泰樂菌素為畜禽專用抗生素，它是由Streptomyces?thermotolerance變異菌株，以泰樂菌素為底物經生物轉化所產生的一種比泰樂菌素活性更高的抗菌藥物。公開的乙酰異戊酰泰樂菌素的提取方法是將菌體從轉化培養液中分離出去，得濾液，然后用堿調濾液pH5.5～9.8，使乙酰異戊酰泰樂菌素從濾液中析出，用離心或過濾的方法分離析出的乙酰異戊酰泰樂菌素；然后將酒石酸與乙酰異戊酰泰樂菌素混合，并用水溶解，經噴霧干燥脫水得酒石酸乙酰異戊酰泰樂菌素。用該工藝制備乙酰異戊酰泰樂菌素或酒石酸乙酰異戊酰泰樂菌素收率為82～86％。

本發明是在濾液中加入足夠量的氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀或硫酸銨，并用堿液調pH5.5～9.8，使乙酰異戊酰泰樂菌素從濾液中析出，水相中殘留效價僅為3～22μg/ml，其析出率可達到99.5％(如在濾液中不加入上述5種鹽的任意一種，乙酰異戊酰泰樂菌素析出率僅有93％左右，A組份在水中殘留效價為400～600μg/ml)；之后用離心或過濾的方法分離析出的乙酰異戊酰泰樂菌素；然后將酒石酸與乙酰異戊酰泰樂菌素用甲醇或乙醇溶解，用噴霧干燥的方法或蒸餾的方法脫溶媒，得酒石酸乙酰異戊酰泰樂菌素。乙酰異戊酰泰樂菌素在甲醇或乙醇中成鹽和干燥，其收率比在水中成鹽干燥收率高5～8％。因此，用本工藝生產酒石酸乙酰異戊酰泰樂菌素收率可達91～96％。

發明內容

本發明技術是關于乙酰異戊酰泰樂菌素提取方法，其特征在于向含乙酰異戊酰泰樂菌素生物轉化濾液或含乙酰異戊酰泰樂菌素的含水液體中加入重量/體積比為8～40％的氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀或硫酸銨，使乙酰異戊酰泰樂菌素從生物轉化濾液中或從含乙酰異戊酰泰樂菌素的含水液體中析出；然后固液分離，得含乙酰異戊酰泰樂菌素的固體物。在以上5種鹽中，以硫酸鈉為最好，適宜使用范圍為15～26％(W/V)；鹽析的適宜溫度為27～33℃，適宜pH為7.2～8.2。在向生物轉化濾液中或在含乙酰異戊酰泰樂菌素的水溶液中加入以上5種鹽時，可以是一次加入，也可以分次分步加入，即采用分步鹽析法，來提取乙酰異戊酰泰樂菌素，這樣得到的乙酰異戊酰泰樂菌素純度高。

以上所述的含乙酰異戊酰泰樂菌素的固體物可用酸水溶解，然后過濾，除去不溶物，得含乙酰異戊酰泰樂菌素鹽的水溶液。酸水的適宜用量為：相當于生物轉化濾液量的十分之一左右，酸水可以是磷酸水溶液或酒石酸水溶液或乙酸水溶液或鹽酸水溶液，優選磷酸水溶液；酸水的適宜pH值范圍為2.5～4.5。

將如上所述的含乙酰異戊酰泰樂菌素鹽的水溶液用活性碳脫色，或不用活性碳脫色，然后在攪拌條件下，用堿液調pH7.2～8.2，使乙酰異戊酰泰樂菌素從水溶液中析出；進一步固液分離，得乙酰異戊酰泰樂菌素和母液。

向母液中加入Na₂SO₄到飽和狀態，使母液中殘留的乙酰異戊酰泰樂菌素析出，然后固液分離，得從母液中回收的乙酰異戊酰泰樂菌素。

母液也可以采用如下方法處理：向母液中加入相當于生物轉化濾液體積0.4～5％的疏水性有機溶劑，如乙酸丁酯、4-甲基-2-戊酮或甲苯，然后向母液中加入硫酸鈉或氯化鈉到飽和狀態，充分混合后，靜置分相或離心分相，回收有機相；向有機相中加入酸水反萃取，得含乙酰異戊酰泰樂菌素鹽的水溶液。該水溶液用堿液調pH值為7.2～8.2，并加入硫酸鈉到飽和狀態，使乙酰異戊酰泰樂菌素析出，進一步固液分離，得乙酰異戊酰泰樂菌素。

將如上所述的乙酰異戊酰泰樂菌素干燥(也可以不干燥)，用甲醇或乙醇溶解，并加入相當于乙酰異戊酰泰樂菌素1/2摩爾量的酒石酸或加入磷酸，充分混合成鹽后，采用蒸餾或噴霧干燥的方法脫溶劑，得酒石酸乙酰異戊酰泰樂菌素或磷酸乙酰異戊酰泰樂菌素。

選擇的從生物轉化濾液中提取乙酰異戊酰泰樂菌素或乙酰異戊酰泰樂菌素鹽的方法如下：

a、將生物轉化濾液在5～25℃條件下調pH2.5～4.5，然后分別用孔徑為10μm、1～5μm、0.2μm的過濾器過濾，得精濾液。