[發明專利]胡椒木離體培養方法

無效

• 申請號: 200810067649.X
• 申請日: 2008-06-06
• 公開（公告）號: CN101288382A
• 公開（公告）日: 2008-10-22
• 發明（設計）人: 李曉東;徐浩;張曉紅
• 申請（專利權）人: 深圳職業技術學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;C12N5/04
• 代理公司: 深圳市維邦知識產權事務所
• 代理人: 黃莉

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，涉及植物組織培養技術，具體涉及一種胡椒木離體培養方法。?

背景技術

胡椒木(Zanthoxylum?Piperitum)，是蕓香科多年生常綠灌木，又名黑胡椒、山椒、風車草。株高約30～90公分，雌雄異株，雄花黃色，雌花紅橙色，子房3～4個，果實橢圓形。胡椒木的觀賞價值較高，主要集中在枝葉上，約0.6公分的倒卵形對生小葉，革質，濃綠油亮，嬌小玲瓏，非常可愛。枝葉青翠適合修剪成型、庭植美化、綠籬或盆栽，成為庭院、公園中進行平面及垂直綠化的良好材料。胡椒木一般采用扦插方式繁殖，但是扦插繁殖受母株材料和繁殖季節的影響，往往無法滿足市場的需要。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種任何季節均能大量快速繁殖胡椒木的方法。?

為解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案：?

胡椒木離體培養方法，包括如下步驟：?

S1)、準備外植體：即準備適合發芽的胡椒木莖段作為外植體；?

S2)、誘導：將步驟S1準備的外植體接種于幼芽誘導培養基上，使得外植體上發出幼芽，所述的幼芽誘導培養基為MS+6-芐基腺嘌呤0.5～4.0mg/L+萘乙酸0.1～0.7mg/L；?

S3)、增殖：將步驟S2中所述幼芽接種于增殖培養基上增殖產生叢生芽，所述增殖培養基為MS+6-芐基腺嘌呤0.5～2.0mg/L+萘乙酸0.1～0.7mg/L；?

S4)、生根：將步驟S3中所述的叢生芽接種于生根培養基使得叢生芽生根，即成胡椒木幼苗，所述生根培養基為1/2?MS+萘乙酸0.05～0.5mg/L。?

優選的技術方案中，所述幼芽誘導培養基優選為MS+6-芐基腺嘌呤1.0mg/L+萘乙酸0.7mg/L。?

優選的技術方案中，所述增殖培養基優選為MS+6-芐基腺嘌呤1.0mg/L+萘乙酸0.7mg/L。?

優選的技術方案中，所述生根培養基優選為1/2MS+萘乙酸0.4mg/L。?

具體的，所述步驟S1包括制作外植體和消毒兩個步驟；所述制作外植體是指選擇胡椒木枝條剪切成包括側芽的胡椒木莖段；所述消毒是指對前述胡椒木莖段進行消毒處理。?

優選的技術方案中，所述制作外植體具體包括：挑選健壯的當年生胡椒木幼嫩枝條，除去葉片后用蒸餾水清洗，然后剪成胡椒木小段，并且使得每段胡椒木小段至少包含一個側芽，每小段包含側芽的胡椒木莖段即是外植體。?

優選的技術方案中，所述消毒是指對作為外植體的胡椒木莖段先用75％酒精消毒，再用0.1％的升汞溶液消毒，之后再用無菌水沖洗。?

采用本發明技術方案的胡椒木離體培養方法，與現有技術對比的有益效果在于：?

由于采用了組織培養技術對胡椒木進行離體培養，可以不受季節限制，快速低成本的繁殖出大量胡椒木的幼苗，因而經濟效益可觀，具有良好的市場前景。?

由于采用特制的MS+6-芐基腺嘌呤0.5～4.0mg/L+萘乙酸0.1～0.7mg/L作為幼芽誘導培養基，在其中誘導外植體發芽，發芽率高。?

由于進一步優選了幼芽誘導培養基的配方，使得發芽率最高可達95.8％。?

由于采用特制的MS+6-芐基腺嘌呤0.5～2.0mg/L+萘乙酸0.1～0.7mg/L作為增殖培養基，在其中對幼芽進行增殖，可使得幼芽產生出大量的叢生芽。?

由于進一步優選了增殖培養基的配方，使得增殖效果最好。?

由于采用了特制的1/2MS+萘乙酸0.05～0.5mg/L作為生根培養基，生根效果好。?

由于進一步優選了生根培養基的配方，使得生根效果最好，生根率最高可達98％。?

由于準備外植體除了包括制作外植體外，還包括消毒，使得外植體干凈無污染，可以保證后續步驟順利進行。?

由于選用強壯的一年生幼嫩胡椒木枝條制作外植體，可以保證培養出來的胡椒木幼苗的遺傳學質量。?

由于消毒包括酒精消毒和升汞溶液消毒，并且消毒后用無菌水清洗，使得消毒非常徹底。?

附圖說明

圖1是本發明具體實施方式中幼芽誘導階段初期的植株圖；?

圖2是本發明具體實施方式中幼芽誘導階段后期的植株圖；?

圖3是本發明具體實施方式中幼芽增殖階段的植株圖；?

圖4是本發明具體實施方式中叢生芽生根階段的植株圖。?

以下將結合附圖對胡椒木莖段離體培養做進一步的說明。?

具體實施方式