[發明專利]人源化抗CD25單鏈抗體及制備方法有效
| 申請號: | 200810066250.X | 申請日: | 2008-03-27 |
| 公開(公告)號: | CN101544695A | 公開(公告)日: | 2009-09-30 |
| 發明(設計)人: | 萬琳;盧曉風;程驚秋;蔡華偉;陸燕蓉;李勝富;張杰;李幼平;步宏 | 申請(專利權)人: | 四川大學華西醫院 |
| 主分類號: | C07K16/28 | 分類號: | C07K16/28;C12N15/13;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司: | 北京律誠同業知識產權代理有限公司 | 代理人: | 黃韌敏 |
| 地址: | 610041四*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 人源化抗 cd25 抗體 制備 方法 | ||
1.一種制備人源化抗CD25單鏈抗體的方法,包括下述步驟:
1)構建基于daclizumab的重鏈可變區和輕鏈可變區的核苷酸序列,如SEQ? ID?No.4所示;
2)將所述核苷酸序列可操作地插入畢赤酵母pPIC9K,構建畢赤酵母表達 載體,表達載體結構如圖2所示;
3)將步驟2)所述的畢赤酵母載體轉化入畢赤酵母菌株;
4)在適宜條件下培養步驟3)所得的轉化畢赤酵母菌株,誘導單鏈抗體 的表達;
5)分離純化步驟4)所得培養產物即獲得所述人源化抗CD25單鏈抗體;
其中步驟4)的誘導條件是BMMY培養基pH6.0,誘導物甲醇濃度為3.0%、 誘導起始濃度為OD600=60、誘導時間為96h。
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