[發(fā)明專(zhuān)利]一種南瓜花葉病毒長(zhǎng)期保存方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810064735.5
• 申請(qǐng)日: 2008-06-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101289656A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-10-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張俊華;崔崇士;劉學(xué)敏;孫洪利
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N7/00
• 分類(lèi)號(hào): C12N7/00
• 代理公司: 哈爾濱市哈科專(zhuān)利事務(wù)所有限責(zé)任公司
• 代理人: 劉婭

1.一種南瓜花葉病毒長(zhǎng)期保存方法，其特征在于：首先將待保存的毒源置于防蟲(chóng)溫室內(nèi)進(jìn)行隔離活化繁殖，待發(fā)病后，取中位重病葉按每1g中位病葉加入5ml磷酸緩沖液的比例，加入0.02M?pH?7.0磷酸緩沖液于研缽中研磨，研成漿糊狀，四層紗布過(guò)濾，去濾渣，濾液經(jīng)4000rpm離心30min，去渣，上清液裝入玻璃管，按病毒粗提液體積加入0.8％谷氨酰胺酸鈉、2％葡萄糖和2％丙三醇，冷凍干燥后密封保存。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種南瓜花葉病毒長(zhǎng)期保存方法，其特征在于：所述的在防蟲(chóng)溫室內(nèi)進(jìn)行隔離活化繁殖步驟為：實(shí)驗(yàn)用具和栽培土均經(jīng)高壓熱力消毒，取高感SqMV的南瓜種子催芽后播種，待南瓜苗長(zhǎng)到3-4片真葉時(shí)，稱(chēng)取5g保存的毒源葉片放入研缽中，同時(shí)加入25ml?0.02M?pH7.0磷酸緩沖液進(jìn)行研磨，將葉片研磨成漿糊狀，采用摩擦接種法接種后放入防蟲(chóng)溫室中待其發(fā)病，防蟲(chóng)溫室中白天20℃，晚上10℃。