[發(fā)明專利]一種冬凌草有效組分及制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810063015.7
• 申請日: 2008-07-04
• 公開（公告）號: CN101317837A
• 公開（公告）日: 2008-12-10
• 發(fā)明（設計）人: 程翼宇;水文波;葛志偉;劉靂
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K31/352
• 分類號: A61K31/352;A61K36/53;A61P35/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 張法高;趙杭麗

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬中藥提取物，具體地說涉及從冬凌草中提取的有效組分，及其制備方法，以及該有效組分在制備治療、預防腫瘤藥物中的應用。

背景技術(shù)

腫瘤是一種常見病、多發(fā)病，其中惡性腫瘤是目前危害人類健康最嚴重的一類疾病。目前業(yè)內(nèi)對惡性腫瘤的治療主要還是以手術(shù)、放療、化療為主，但許多化學抗癌藥物在作用于靶細胞時往往累及正常細胞，造成嚴重的副反應。植物藥的遺傳毒性不明顯，中草藥在抗癌抗突變方面有獨特的優(yōu)勢和廣闊的應用前景，而且中藥在對腫瘤的輔助治療中也起到不容忽視的作用。紫杉醇即是典型的從植物中獲得的具有良好抗癌活性的天然化合物，現(xiàn)已開發(fā)為抗腫瘤藥物。目前我國危害性最為嚴重的腫瘤為肺癌、鼻咽癌、食管癌、胃癌、大腸癌、肝癌、乳腺癌、宮頸癌、白血病及淋巴瘤等。特別是肝癌的發(fā)生率近年來有所增加。值得重視，這些腫瘤的病因?qū)W、發(fā)病學及其防治，均為我國腫瘤研究的重點。尋找高效低毒的抗癌藥物以及抗癌輔助藥物是當前腫瘤研究的重要內(nèi)容。

我國藥用生物資源十分豐富，其生理活性物質(zhì)是研究和發(fā)現(xiàn)新藥先導化學物，開發(fā)新藥的天然寶庫。目前，我國從天然產(chǎn)物中提取活性物質(zhì)，用于開發(fā)成治療腫瘤疾病、安全性好、毒性低的新藥還很少，從天然產(chǎn)物中提取活性物質(zhì)，開發(fā)成具有抗腫瘤療效的新藥，具有重要應用價值和廣闊發(fā)展前景。

冬凌草又名冰凌草、六月令，得名于冬天全株結(jié)滿薄如蟬翼的銀白色冰凌片，植物來源為唇形科香茶菜屬植物碎米椏(Rabdosia?rubescens(Hemls.)Hara)，廣布于黃河、長江流域，主產(chǎn)地在河南濟源太行山一帶。河南、安徽、湖北、貴州等地均有產(chǎn)，其中以河南濟源市產(chǎn)最佳。全草含有單萜、倍半萜、二萜等多種萜類化合物以及少量揮發(fā)油、生物堿，其中冬凌草素是含量較高的二萜類成分，具有很強的苦味。另外，還從中分離得到了水楊酸和三個黃酮類化合物——胡麻素、線薊素和Pedalitin(李欽，等.冬凌草化學成分、藥理作用及開發(fā)研究進展.河南中醫(yī)學院.2003，6(18)：31-33)。

冬凌草味甘苦，性微寒，具清熱解毒、消炎止痛、健胃活血及抗腫瘤之功效。冬凌草對金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、乙型鏈球菌均有小劑量抑菌，大劑量殺菌作用，其中肺炎雙球菌對之最敏感。另外，冬凌草醇提物對大鼠棉球肉芽腫有抑制作用，對小鼠有鎮(zhèn)痛作用(段曉穎.復方冬凌草含片體外抗菌實驗研究.河南中醫(yī)藥學刊，1997，12(3)：38-40)。研究表明，冬凌草甲素具有抑制腫瘤細胞增值、誘導腫瘤細胞調(diào)亡等作用(辛慶鋒，等.冬凌草甲素抗腫瘤作用機制研究進展.醫(yī)學綜述.2008，14(3)：455-456)。冬凌草甲素還有抗突變作用(楊勝利，張巧.冬凌草甲素抗突變性研究.癌變·畸變·突變，2001，13(1)：8-10.)、β受體拮抗作用(李琦，劉潔.冬凌草甲素對家兔血流動力學的影響及機理研究[J].白求恩醫(yī)科大學學報，1994，20(2)：128-129.)、抗氧化作用(張予，王筠.冬凌草甲素對活性氧自由基的清除作用.河南醫(yī)學研究，1998，8(2)：100-104.)。冬凌草多糖在體外高濃度下可以抑制EAC腫瘤細胞的生長，小鼠體內(nèi)進一步研究發(fā)現(xiàn)其能夠抑制S180的生長，且對S180的抑瘤效應呈現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系。冬凌草多糖對體液免疫和細胞免疫均有增強作用(王一飛，江金花，王慶端，等.冬凌草多糖的抗腫瘤及其免疫增強作用.中國病理生理雜志，2002，18(11)：1341-1343.)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種冬凌草有效組分，該有效組分主要含有化合物A：Coetsoidin?F，化合物B：Coetsoidin?C，其中化合物A的摩爾百分比含量為70～90％，化合物B的摩爾百分比含量為5～20％。

優(yōu)選化合物A的摩爾百分比含量為75～85％，化合物B的摩爾百分比含量為8～15％。

化合物A的結(jié)構(gòu)式為：

化合物B的結(jié)構(gòu)式為：

本發(fā)明的另一目的是提供該冬凌草有效組分的制備方法，通過以下步驟實現(xiàn)：將冬凌草藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱提取得提取液，將提取液濃縮成浸膏，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品；制備色譜的分離條件：色譜柱為制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫，收集溶液，溶液經(jīng)濃縮干燥后得到有效組分。