[發明專利]一種弓形蟲感染早期檢測的方法無效
| 申請號： | 200810062836.9 | 申請日： | 2008-06-30 |
| 公開（公告）號： | CN101315381A | 公開（公告）日： | 2008-12-03 |
| 發明（設計）人： | 譚峰;潘長旺;沙丹;李麗寧 | 申請（專利權）人： | 溫州醫學院 |
| 主分類號： | G01N33/569 | 分類號： | G01N33/569;G01N33/53 |
| 代理公司： | 溫州甌越專利代理有限公司 | 代理人： | 李友福 |
| 地址： | 325035浙江省溫*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 弓形蟲 感染 早期 檢測 方法 | ||
1、一種弓形蟲感染早期檢測的方法，其特征在于由以下步驟組成：
1)用碳酸緩沖液稀釋純化后的NTPase-II制成5μg/ml的包被液，100μl/孔包被96孔酶標板，4℃包被過夜；
2)PBST洗板3-5次，2-3min/次，拍干；
3)加5％的脫脂奶粉，37℃封閉2h；
4)PBST洗板5-7次，2-3min/次，拍干；
5)加入稀釋度為1∶100的被檢血清，100μl/孔，37℃孵育1.5h；
6)PBST洗板5-7次，2-3min/次，拍干；
7)加入稀釋度為1∶4000的羊抗鼠酶標二抗IgM，100μl/孔，37℃孵育1h，PBST洗板5-7次，2-3min/次，拍干；
8)加入底物顯色液A液和B液，37℃避光顯色10-15min，加終止液，50μl/孔；
9)酶標儀讀數，450nm處空氣調零后測OD值，以陰性血清的OD450nm平均值和3倍標準差之和作為陰性血清的上限，當血清的OD450nm≥X+3S者即判斷為陽性血清，反之則為陰性。
2、一種弓形蟲感染早期檢測的方法，其特征在于由以下步驟組成：
1)用碳酸緩沖液稀釋純化后的NTPase-II制成5μg/ml的包被液，100μl/孔包被96孔酶標板，4℃包被過夜；
2)PBST洗板3-5次，2-3min/次，拍干；
3)加5％的脫脂奶粉，37℃封閉2h；
4)PBST洗板5-7次，2-3min/次，拍干；
5)加入稀釋度為1∶200的被檢血清，100μl/孔，37℃孵育1.5h；
6)PBST洗板5-7次，2-3min/次，拍干；
7)加入稀釋度為1∶4000的羊抗鼠酶標二抗IgG，100μl/孔，37℃孵育1h，PBST洗板7次，2-3min/次，拍干；
8)加入底物顯色液A液和B液，37℃避光顯色10-15min，加終止液，50μl/孔；
9)酶標儀讀數，450nm處空氣調零后測OD值，以陰性血清的OD450nm平均值和3倍標準差之和作為陰性血清的上限，當血清的OD450nm≥X+3S者即判斷為陽性血清，反之則為陰性。
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