[發明專利]烏靈膠囊標準指紋圖譜的建立方法和烏靈膠囊的鑒別方法

有效

• 申請號: 200810062726.2
• 申請日: 2008-07-01
• 公開（公告）號: CN101387620A
• 公開（公告）日: 2009-03-18
• 發明（設計）人: 俞有強;陳建;羅艷萍;朱方劍;陳文祥
• 申請（專利權）人: 浙江佐力藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務所有限公司
• 代理人: 王鵬舉

技術領域

本發明涉及烏靈膠囊的鑒別，尤其涉及烏靈膠囊標準指紋圖譜的建立方法和烏靈膠囊的鑒別方法。?

背景技術

烏靈菌粉是浙江佐力藥業股份有限公司利用現代生物發酵技術，從天然烏靈參中分離菌種，經過發酵而得的國家一類新藥，化學成分主要含有腺苷為主的核苷類物質、氨基酸、異黃酮、微量元素、維生素等營養物質。烏靈膠囊是純烏靈菌粉制劑，有補腎健腦、養心安神功效，臨床上用于神經衰弱的心腎不交證，癥見心煩焦慮，失眠多夢，入睡困難，多夢驚恐，心悸，健忘，頭暈耳鳴等。烏靈膠囊為浙江佐力藥業股份有限公司獨家生產和享有品種，但隨著烏靈膠囊在臨床的廣泛應用，銷量逐年快速增長，市場上也出現一些假冒烏靈膠囊的產品，由于現行標準所測定的腺苷并非烏靈膠囊特有成分，建立一種在整體上更好控制烏靈膠囊質量并作為鑒別真偽指標的鑒別方法，具有重要意義。?

發明內容

為了建立一種在整體上更好控制烏靈膠囊質量并作為鑒別真偽指標的鑒別方法。本發明的一個目的是提供烏靈膠囊色譜分析供試溶液和供試溶液配置方法。本發明的第二個目的是提供烏靈膠囊的鑒別方法。?

為了實現上述的第一個目的，本發明采用了以下的技術方案：?

烏靈膠囊標準指紋圖譜的建立方法，該方法包括以下的步驟：(1)取烏靈膠囊內容物，加入極性小的有機溶劑，加熱回流0.5～2小時，放冷，濾過，藥渣揮干溶劑；(2)加甲醇或含水甲醇，稱重，加熱回流或超聲提取0.5～1小時，?放冷，再稱重，加甲醇補足重量，濾過，以續濾液作為供試品溶液；(3)對照品溶液采用：取腺苷對照品適量，加甲醇溶液溶解，制成含腺苷溶液，作為對照品溶液；(4)然后分別吸取對照品溶液及供試品溶液，分別注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，記錄色譜圖；(5)以腺苷峰為參照，計算各共有特征峰的相對保留時間和相對峰面積，建立起標準指紋圖譜。?

作為優選，上述的有機溶劑選用石油醚、環己烷、正己烷中的任意一種。?

作為優選，上述的液相色譜條件為：檢測波長為240～260nm；流速0.6ml/min～0.8ml/min；色譜柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相為甲醇-0.1％磷酸溶液，梯度洗脫。?

作為優選，上述的標準指紋圖譜的相對保留時間和峰面積比值如下：?

各峰的相對保留時間為：1號峰：0.187±20％、2號峰：0.468±20％、3號峰：0.723±20％、5號峰：2.198±20％、6號峰：2.232±20％、7號峰：2.437±20％，8號峰：2.480±20％，參照峰4號峰，為腺苷峰；各峰的峰面積比值：2號峰：0.60～0.95，3號峰：0.48～0.90；參照峰4號峰，為腺苷峰。?

為了實現上述的第二個目的，本發明采用了以下的技術方案：?

烏靈膠囊的鑒別方法，采用上述的任意一種方法建立的標準指紋圖譜，所測定的供試品指紋圖譜與標準指紋圖譜的相似度大于0.9。?

本發明的優點如下：?

(1)因C₁₈色譜柱對油脂性物質有強保留，易引起色譜柱堵塞，柱效下降，縮短色譜柱使用壽命，本發明供試品溶液是采用石油醚等低極性溶劑脫脂，以保護色譜柱。?

(2)本發明的供試品溶液是用甲醇或含水甲醇超聲或加熱回流提取，兼顧其水溶性及脂溶性兩部分的化學成分，具有簡便、穩定、精密度高以及重現性好?等優點，彌補了烏靈菌粉現行質量標準中只涉及其中單一成分的缺點，使對產品質量的控制更加全面、真實、科學。?

(3)本發明采用高效液相色譜法進行檢測，檢測波長為260nm，研究證明，供試品溶液在該波長處色譜峰最多，各峰之間分離度也較好，所以該條件下測定的指紋圖譜更能全面反映烏靈膠囊所含的化學成分。?

附圖說明

圖1為腺苷對照品圖譜。?

圖2為烏靈膠囊指紋圖譜。?

具體實施方式

下面結合實施例對本發明做進一步說明，下述實施僅用于說明本發明而并非對本發明的限制。?

1儀器與試藥?

1.1儀器?

戴安高效液相色譜儀；UVD-340U檢測器；變色龍工作站。?

1.2試藥?

腺苷對照品：中國藥品生物制品檢定所提供；甲醇：色譜純；水：重蒸水；其它試劑為分析純。烏靈膠囊：浙江佐力藥業股份有限公司生產。?

2色譜條件?