[發明專利]一種快速提取真菌DNA的SLS裂解液及其應用

無效

• 申請號: 200810059177.3
• 申請日: 2008-01-16
• 公開（公告）號: CN101230344A
• 公開（公告）日: 2008-07-30
• 發明（設計）人: 陳廣進;李紅葉;張志芳
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司
• 代理人: 胡紅娟

1.一種快速提取真菌DNA的SLS裂解液，其特征在于：由以下組分組成(以溶液總體積計)：

N-月桂酰肌氨酸鈉????1～3g/100ml

Tris-HCl????????????150～300mmol/L

NaCl????????????????150～300mmol/L

EDTA????????????????50～100mmol/L

水??????????????????余量

PH值為7.5～8.5。

2.根據權利要求1所述的SLS裂解液的應用，包括以下步驟：

(1)將真菌菌絲加入SLS裂解液中，在50～80℃下水浴加熱10～15min后離心；

(2)將萃取劑加入步驟(1)離心所得的上清液中抽提DNA，再次離心；

(3)將DNA沉淀劑加入步驟(2)離心所得的上清液中混合均勻，靜置后離心沉淀DNA；

(4)將DNA沉淀用70％～75％的乙醇洗滌后干燥。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述的步驟(2)中萃取劑為氯仿和異戊醇的混合溶劑或為苯酚、氯仿和異戊醇的混合溶劑。

4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述的步驟(2)中萃取劑與步驟(1)離心所得的上清液體積比為1∶1～2∶1。

5.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述的步驟(3)中DNA沉淀劑為無水乙醇或異丙醇。

6.根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述的步驟(3)中DNA沉淀劑加入步驟(2)離心所得的上清液體積比為2∶1～3∶1。