[發明專利]一種檢測水溶液中草酸根的方法

無效

• 申請號: 200810054882.4
• 申請日: 2008-04-25
• 公開（公告）號: CN101285776A
• 公開（公告）日: 2008-10-15
• 發明（設計）人: 陰彩霞;孫遠強;霍方俊;劉艷林
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/33
• 代理公司: 山西五維專利事務所（有限公司）
• 代理人: 楊耀田

技術領域：

本發明涉及一種草酸根的檢測方法，具體屬于一種檢測水溶液中草酸根的方法。

背景技術：

草酸是一種高毒性化合物，廣泛存在于植物、動物、微生物中，在體內的蓄積可引起多種病理狀態，如尿石癥、高草酸尿癥和腎衰等。尿液中草酸鹽濃度增高可能是糖尿病等疾病的癥狀，減低可能是急慢性腎炎。日常飲食中草酸過量，可在吸收前與鈣形成不溶物，妨礙鈣的吸收；吸收后又可與鈣及其他物質形成結石，據報道70％-80％腎結石是以草酸鈣為主要成分。利用臭氧殺菌的飲料，當其中維生素C的含量較高時會形成草酸，從而促進微生物的再生，降低殺菌效果。同時草酸作為真菌分泌的毒素并參與致病，目前已在核盤菌屬、曲霉屬、栗疫殼菌屬、倒杯傘菌屬、絲核菌屬、小核菌屬和Crystulariella等屬中有報道。草酸在上述真菌屬的致病過程中都起著重要作用。由此看來，在水溶液中草酸的定量檢測是很重要的。

關于測定水溶液中的草酸根，以往國內外對檢測草酸根的方法可歸納為以下幾種：

1、滴定法，以硫酸高鈰為滴定劑，用鐵-鄰菲鑼啉為指示劑(武小玲等，新疆醫科大學報，22(1999)148)；

2、比色法，將草酸氧化或還原，或直接與一定顯色劑反應生成有色物質(沈友等，光譜學與光譜分析，18(1998)756-758)；

3、離子色譜法(DelNozal，M.J，J.Chromatograohy?A，881(2000)629-638)；

4、毛細管電泳分析法(Bryant，C.N，Chromatography?A，771(1997)285-299)；

5、高效液相色譜法(俞樂，彭新湘，楊崇等，分析化學研究簡報，30(2002)1119-1122)；

6、酶法(Thakue，M.，Goyal，L.，and?Pundie，C.S，J.BiochemBiophys.Methods，44(2000)77-88)。

但以上的這些方法分別存在一些問題：

1、滴定法靈敏度低，操作較繁瑣、耗時；

2、其他比色法需要預沉淀，難于完全將草酸根提取出來，并且操作繁瑣且重復性較差；

3、毛細管電泳儀器尚未普及；

4、高效液相色譜法要求對草酸根進行分離，分離過程中無機酸的干擾較嚴重，且儀器昂貴，對操作人員要求較高；

5、草酸氧化酶造價較高，限制了該法的大范圍應用。

發明內容：

本發明的目的在于提供一種成本低、操作簡單、靈敏度高的檢測水溶液中草酸根的方法。

本發明提供一種檢測水溶液中草酸根的方法，該方法基于Cu²⁺離子，以鄰苯二酚紫為顯色劑，在pH為6.0的HEPES緩沖溶液中直接并定量地檢測水溶液中的草酸根，其具體檢測步驟包括：

1、配制pH6.0的濃度為10mM的HEPES緩沖溶液，并分別配制濃度為2mM的Cu²⁺溶液和鄰苯二酚紫溶液；

2、將上述2ml的HEPES緩沖溶液加到紫外比色皿中，作為空白，用微量進樣器吸取上述的鄰苯二酚紫溶液10-100μl加到比色皿中，此時溶液由無色變黃色，在紫外可見分光光度儀上檢測，443nm有最大吸收；

3、在上述的比色皿中，再加入摩爾數2倍于鄰苯二酚紫溶液的Cu²⁺溶液，此時溶液由黃變藍，在紫外可見分光光度儀上檢測，發現最大吸收峰由上述的443nm變為624nm；

4、取被測草酸根溶液，用微量進樣器逐漸加到比色皿中，邊加樣邊在紫外可見分光光度儀上檢測，隨著溶液的加入，最大吸收峰又由624nm逐漸向443nm變回，溶液的顏色也逐漸由藍變回黃色，當吸收峰在443nm達到最大，溶液的顏色完全變黃時，停止加溶液；

5、按[Cu²⁺]×2×V_Cu/V_草酸根計算出溶液中草酸根的含量。

所述的Cu²⁺溶液是水溶性的二價銅無機鹽溶液如氯化銅、硝酸銅、硫酸銅、醋酸銅、高氯酸銅的溶液等。

本發明檢測水溶液中草酸根的方法可以應用于臨床、食品和環境中草酸根的檢測。

本發明的檢測方法對草酸根的選擇性相對其它陰離子是專一的，即其它陰離子的存在不干擾本方法對草酸根的測定。證明實驗：在步驟3所述的比色皿中，分別或依次加入摩爾數10倍于步驟4中草酸根量的醋酸根、硝酸根、碳酸根、磷酸根、磷酸氫根、氟離子、氯離子或溴離子，在紫外可見分光光度儀上檢測，在624nm最大吸收峰均沒有變化，體系顏色也沒有改變。