[發(fā)明專利]翦股穎上兩種腥黑粉菌近似種的分子檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810053814.6
• 申請日: 2008-07-11
• 公開（公告）號: CN101328494A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅加鳳;黃國明;廖芳;劉躍庭;張?jiān)＞?/a>;楊秀麗
• 申請（專利權(quán)）人: 天津出入境檢驗(yàn)檢疫局動植物與食品檢測中心
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 天津市鼎和專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 李鳳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及使用PCR技術(shù)檢測寄生于禾本科草種翦股穎(Agrostis?spp?L.)中翦股穎腥黑粉菌[Tilletia?sphaerococca(Wallr)Waldh]和小麥網(wǎng)腥黑穗菌(T.caries，簡稱TCT)的方法。屬于禾本科草種腥黑粉菌檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)

翦股穎屬(Agrostis?L.)為禾本科多年生草本，多分布于寒溫地帶，作為草坪草和牧草的主要有2種(匍匐型和細(xì)弱型)，近年來我國的進(jìn)口量很大。匍匐翦股穎(A.stolonifera?Huds)原產(chǎn)于歐亞大陸，具有侵占性很強(qiáng)的匍匐莖，節(jié)上土生不定根；質(zhì)地細(xì)膩，形成的草坪致密，耐踐踏、耐低修剪，剪后再生力強(qiáng)；耐寒冷潮濕能力強(qiáng)，是最抗寒的冷季型草坪草之一；耐旱、耐鹽堿，耐澇；生長低矮、抗病力強(qiáng)、生長繁殖迅速；我國東北、華北、西北及江西、浙江等省區(qū)均有分布，廣泛用于草坪建植。此外，還可用作地下水位較高、潮濕處的保土植物以及由于再生草品質(zhì)高、多汁而營養(yǎng)豐富，可作牧草栽培。細(xì)弱翦股穎(A.tenuis?Sibth)產(chǎn)于歐亞大陸的北溫帶，質(zhì)地細(xì)，為草皮型多年生草坪草，它通過匍匐莖和根莖擴(kuò)展，易形成致密的草坪，適應(yīng)于多種土壤，粘土、砂土以及瘠薄且缺鈣質(zhì)的土壤上均能生長，莖葉柔軟，適口性好，也是一種優(yōu)良的牧草、草坪草和保土植物(王棟原著，任繼周等修訂.牧草學(xué)各論，新一版，江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，1989，153-154)。

腥黑粉菌是翦股穎植物上重要的真菌病害。Vanky認(rèn)為僅有Tilletia?sphaerococca(Wallr)Waldh侵染翦股穎(Vanky.1994.European?smut?fungi.Gustav?Fisher?Verlag；Stuttgart)，根據(jù)Fisher?&?Duran(Duran?R，F(xiàn)ischer?G?W.1961.The?Genus?Tilletia.Pullman?Washington?StateUniversity?Press)、Lindeberg(Lindeberg?B.1959.Ustilaginales?of?Sweden.Symb.Bot.Upsal.16：67-75.)的報(bào)道，侵染翦股穎的腥黑粉菌有T.pallida?Fisch和T.sphaerococca，而T.Matsumoto則認(rèn)為小麥網(wǎng)腥黑穗菌(T.caries，簡稱TCT)、翦股穎腥黑粉菌(T.sphaerococca)和T.pallida都可侵染翦股穎，受這三種腥黑粉菌侵染的植株，子粒最后由聚集成黑粉狀的冬孢子代替(Matsumoto?T?and?Bell?T.1989.Laboratory?guide?identification?of?fungi?quarantine?significanceCalifornia-Smut?fungi)。T.sphaerococca又稱迷惑腥黑粉菌(章正.關(guān)于小麥矮腥病菌某些近似種的探討.植物病理學(xué)報(bào)，1980，10：89-94；Ingold?C?T.The?basidium?of?Tilletia?and?it’sevolution.Mycologist，1997，11：98-100.)，主要危害翦股穎屬，常引起寄主植物矮化[周國梁.禾草腥黑粉菌及其近似種的分類進(jìn)展.植物檢疫，2000，14(3)：160-163.]，該病菌廣泛分布于歐洲各國，我國尚未發(fā)生。T.pallida冬孢子網(wǎng)脊疣狀，不形成網(wǎng)眼狀網(wǎng)目，而T.sphaerococca和TCT的孢壁紋飾呈網(wǎng)眼狀，T.pallida與T.sphaerococca、TCT兩者差異明顯，易于區(qū)分。Boyd，Carris?and?Gray[Boyd，M?L，Carris?L?M?and?Gray?P?M.1998.Characterization?of?Tilletiagoloskokovii?and?allied?species.Mycologia，90(2)：310-322.]、羅加鳳等從病菌冬孢子形態(tài)、自發(fā)熒光現(xiàn)象、萌發(fā)生理特性等方面對T.sphaerococca進(jìn)行了較詳細(xì)的研究[羅加鳳，黃國明，崔鐵軍.進(jìn)境翦股穎草種中腥黑粉菌的檢驗(yàn)鑒定.植物檢疫，2004，18(6)：355-359]，T.sphaerococca冬孢子直徑22-30um，比TCT略大，TCT冬孢子直徑為18-24um，T.sphaerococca萌發(fā)最適溫是10℃一周左右，初生擔(dān)孢子“H”結(jié)合普遍存在，TCT最適溫為17℃一周左右，萌發(fā)產(chǎn)生的初生擔(dān)孢子“H”結(jié)合也普遍存在。