[發(fā)明專利]含PEG化人生長激素綴合物的藥物及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810051562.3
• 申請日: 2008-12-09
• 公開（公告）號: CN101491681A
• 公開（公告）日: 2009-07-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 金磊;裴瑾;王俊才;牛俊
• 申請（專利權(quán)）人: 長春金賽藥業(yè)有限責任公司
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61K38/27;A61P5/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物制藥領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及含低含量的聚乙二醇(PEG)化人生長 激素綴合物的藥物組合物以及低劑量的PEG化人生長激素綴合物針對人患者(尤其是內(nèi)源性 生長激素缺乏而致病的人患者)的藥物用途。該低劑量藥物具有毒副作用更小、生產(chǎn)成本更 低等優(yōu)勢。

技術(shù)背景

人生長激素(hGH)可用于治療因腦垂體機能不足而導(dǎo)致的侏儒癥或Turner綜合癥，另外也 可用于促進兒童生長，治療慢性腎功能不全、艾滋病衰竭、和衰老等。天然的hGH是由人腦 下垂體分泌的蛋白質(zhì)，其由191個氨基酸殘基組成，分子量為22kDa。hGH的主要生物學(xué)功 能是促進幼小的哺乳動物身體組織的生長并保持住老年哺乳動物的組織，其中所涉及的組織 包括骨骼、結(jié)締組織、肌肉、以及諸如肝、腸、和腎等器官的組織。人生長激素還可以通過 成熟的基因重組技術(shù)獲得，如可參見Chang等(Gene，55：189，1987)、Goeddel等(Nature， 281：544，1979)和Gray等(Gene，39：247，1985)的工作。當前已經(jīng)有多種重組hGH可 以從市場上購買，如Genotropin、Nutropin和Somatonorm。

直接給藥hGH等蛋白質(zhì)將由于身體內(nèi)對蛋白質(zhì)的高清除率而使其藥理學(xué)活性作用時間較 短，影響其穩(wěn)定性。為此，人們通過用水溶性聚合物化學(xué)修飾這些蛋白質(zhì)來有效阻滯蛋白水 解酶與蛋白質(zhì)主鏈直接接觸，防止其降解，從而有效降低了其體內(nèi)清除率，改善其穩(wěn)定性， 增加了其在體內(nèi)循環(huán)的時間，從而可以減少給藥次數(shù)。聚乙二醇(PEG)是最常用于化學(xué)修飾蛋 白質(zhì)的水溶性聚合物之一。PCT申請WO9300109A就報道了用PEG修飾人生長激素。然而，據(jù)Clark 等(Journal?of?Biological?Chemistry，271：21969-21977，1996)的研究分析，并非所有PEG 化的hGH綴合物都能保持原有hGH活性，某些hGH的PEG化形式甚至將大大降低其體外活性，以 至于無法進行具有實用性的應(yīng)用。由此，人們進行大量嘗試來開發(fā)在特定位點上進行特異PEG 修飾的hGH綴合物，以期在保持hGH活性的基礎(chǔ)上，降低不均一性和體內(nèi)清除率、增加其在體 內(nèi)的循環(huán)時間、提高穩(wěn)定性。例如，PCT申請WO9711178A公開了通過在hGH中的賴氨酸位點上 進行PEG化，但是這需要在天然人生長激素中引入新的賴氨酸(如K168A和K172R的取代)，其他 研究記載于中國專利(申請)CN100369953C和CN10109080A等文獻內(nèi)。PCT申請WO2003044056A 和中國專利申請CN1477126A分別披露了在hGH的N端進行PEG修飾的綴合物，然而其中公開的制 備步驟只能使最終綴合產(chǎn)物中只有大約90％的PEG綴合到hGH的N端上，即使再加上其中公開的 進一步純化的步驟，最終產(chǎn)生的PEG化的hGH綴合物也只能達到95％左右的純度，其中包括未綴 合的PEG、hGH及它們的降解產(chǎn)物。盡管中國專利申請CN1565624A聲稱可以獲得純度大于98％ 的綴合物，但是其制備(純化)的工藝細節(jié)被刻意掩蓋，甚至沒有PCT申請WO2003044056A和 中國專利申請CN1477126A所披露的達到95％左右的純度的技術(shù)方案詳細，也沒有通過公認的檢 測手段確認該純度產(chǎn)物的存在，無法預(yù)期能取得相應(yīng)純度效果。而本發(fā)明人經(jīng)過艱苦、長期 的努力，也令人驚訝地優(yōu)化出了一種與人生長激素的單一游離氨基共價連接而成的PEG化的 hGH綴合物的制備方法，它可以在不增加生產(chǎn)成本的條件下，通過特定綴合和純化步驟的優(yōu)化 組合，所獲得的綴合物的純度可以遠遠超過95％，甚至可以達到用高效大小排阻層析 (SEC-HPLC)和反相高效液相層析(RP-HPLC)等通用檢測手段檢測達到99％以上的純度水平。 除了具有現(xiàn)有技術(shù)中PEG化的hGH綴合物的優(yōu)點之外，在當前藥物不良反應(yīng)越來越引起患者和 藥物監(jiān)管部門重視的情況下，這種高純度的hGH綴合物對于制備高質(zhì)量的藥物制劑有著非常重 要的意義，不但能減少由于不均一而引起的藥物不良反應(yīng)，而且便于藥物制劑生產(chǎn)中的質(zhì)量 管理。該高純度的hGH綴合物記載于2008年5月30日申請的題名為“純化的PEG化人生長激素 綴合物及其藥物制劑”的中國專利申請第200810050760.8號中，其全文納入本文參考。