[發明專利]乙型肝炎病毒表面抗原檢測微粒、其制備及應用

無效

• 申請號: 200810042392.2
• 申請日: 2008-09-02
• 公開（公告）號: CN101666801A
• 公開（公告）日: 2010-03-10
• 發明（設計）人: 張偉;吳旸;王海蛟;趙衛國
• 申請（專利權）人: 博陽生物科技（上海）有限公司
• 主分類號: G01N33/576
• 分類號: G01N33/576;G01N33/52;G01N33/543;G01N21/64;G01N21/76
• 代理公司: 上海光華專利事務所
• 代理人: 許亦琳;余明偉

1.一種乙型肝炎表面抗原的檢測微粒，為乙型肝炎表面抗體包被的發光微粒。

2.如權利要求1所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒的粒徑范圍為50-400nm。

3.如權利要求2所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒的粒徑范圍為100-300nm。

4.如權利要求1所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒的表面官能團選自羧基或醛基。

5.如權利要求1所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒的發光量為150,000-350,000光子數/100μg發光微粒。

6.如權利要求1-5中任一權利要求所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒與乙型肝炎表面抗體的質量比例為10∶(1-4)。

7.如權利要求6所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒，其特征在于，所述發光微粒與乙型肝炎表面抗體的質量比例為10∶2。

8.如權利要求1-7中任一權利要求所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒的制備方法，包括下列步驟：

a)將發光微粒與乙型肝炎表面抗體混合于緩沖液中獲得混合液；

b)加入緩沖液配制的NaBH₃CN溶液混合并反應；

c)加入緩沖液配制的Gly及NaBH₃CN溶液，混勻反應后，再加入BSA溶液封閉；

d)清洗產物，獲得乙型肝炎表面抗原的檢測微粒。

9.如權利要求8所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒的制備方法，其特征在于，所述緩沖液為MES緩沖液或磷酸緩沖液。

10.如權利要求8所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒的制備方法，其特征在于，所述步驟a的混合液中，發光微粒的濃度為10-40mg/ml。

11.如權利要求8所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒的制備方法，其特征在于，所述步驟d的清洗的方式為離心法清洗。

12.一種乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，包括權利要求1-7中任一權利要求所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒。

13.如權利要求12所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，還包括生物素標記的乙型肝炎表面抗體或親和素包被的感光微粒中的一種或兩種。

14.如權利要求13所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，所述生物素標記的乙型肝炎表面抗體中，生物素與乙型肝炎表面抗體的分子比例為(10-50)∶1。

15.如權利要求14所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，所述生物素標記的乙型肝炎表面抗體中，生物素與乙型肝炎表面抗體的分子比例為40∶1。

16.如權利要求13所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，所述親和素包被的感光微粒中，親和素與感光微粒的質量比例為1∶(3-10)。

17.如權利要求16所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，所述親和素包被的感光微粒中，親和素與感光微粒的質量比例為1∶5。

18.如權利要求13所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，所述乙型肝炎表面抗原的檢測微粒、生物素標記的乙型肝炎表面抗體以及親和素包被的感光微粒分別獨立包裝，且均為混懸液。

19.如權利要求18所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，所述混懸液的溶劑選自HEPES緩沖體系或Tris緩沖體系。

20.如權利要求19所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，乙型肝炎表面抗原的檢測微粒混懸液的溶劑為pH8.0的成分為HEPES、NaCl和EDTA-Na-2H₂O的HEPES緩沖液。

21.如權利要求19所述乙型肝炎表面抗原的檢測試劑盒，其特征在于，生物素標記的乙型肝炎表面抗體混懸液的溶劑為pH8.0的成分為Tris、NaCl和EDTA-Na-2H₂O的Tris緩沖液。