[發明專利]一種γ－聚谷氨酸－氧釩復合物及其制備和應用

無效

• 申請號: 200810039325.5
• 申請日: 2008-06-20
• 公開（公告）號: CN101293101A
• 公開（公告）日: 2008-10-29
• 發明（設計）人: 胡榮章;黃靜;吳自榮;吳葉林;劉堅;孫昭;劉雯;李文娟
• 申請（專利權）人: 華東師范大學
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61K47/34;A61K33/24;A61P3/10;C12P3/00;C12N1/20;C12R1/125
• 代理公司: 上海德昭知識產權代理有限公司
• 代理人: 程宗德;石昭

技術領域

本發明涉及一種γ-聚谷氨酸-氧釩復合物及其制備和應用，確切說，涉及一種VO-γ-PGA復合物及其制備和應用，屬有機釩化合物及其制備和應用的技術領域。

背景技術

糖尿病系一組由于胰島素分泌缺陷及其生物學作用障礙引起的以高血糖為特征的代謝性疾病。它能引起一系列嚴重的并發癥而導致各種臟器的長期損害、功能不全和衰竭，是世界范圍的常見病和多發病。在過去的20年中，世界范圍內糖尿病患者數量呈爆炸性增長，幾乎翻了3倍。目前全世界糖尿病患者總數近2億，估計到2010年將上升到2.2億，2025年將超過3億。隨著經濟的發展和人們生活方式的變化，目前我國糖尿病的患病率和病死率也在呈快速上升趨勢，成為繼心腦血管疾病、腫瘤之后的嚴重危害人民健康的第三大非傳染性疾病。糖尿病患者在最近25年內增加了近5倍。目前我國糖尿病患者人數為4000多萬，僅次于印度居世界第二位，預計每年發病增長率超過6％，因此，高效價廉的抗糖尿病藥物的市場潛力巨大。

釩是人體必需的微量元素，在葡萄糖的代謝過程中起重要作用。早在1899年法國科學家Lynnet就發現釩可以降低尿糖。上世紀80年代，人們就發現了釩的類胰島素作用及抗糖尿病作用，并對硫酸氧釩(VOSO₄)等無機物的降血糖活性作了系統的研究。結果表明這種化合物能降低血糖的水平。

但無機釩化合物的脂溶性小、生物利用度低、活性不高、所需劑量大，并常伴有胃腸道不適、惡心、嘔吐、腹瀉等副作用。為了減少副作用和促進釩化合物的吸收，釩的有機配合物受到廣泛關注，它已經成為國內外科研工作者的研究熱點。國內外一系列研究結果表明，有機釩化合物的降血糖作用一般高于無機釩化合物，脂溶性高，細胞滲透力強，且無明顯的消化道副作用。而他們選擇的配體主要包括：生物小分子氨基酸及其衍生物；低毒的有機羧酸類以及含雜原子三角架型有機化合物。但這些配體分子量都較小，進入體內起不到緩釋效果、生物利用度低、活性不高。此外，有機羧酸類還有一定的毒性。

發明內容

本發明要解決的第一個技術問題是提出一種VO-γ-PGA復合物，其特征在于，該復合物由γ-PGA與VOSO₄通過前者上的羧基與后者上的VO²⁺形成的配位鍵連接而成，其分子結構通式和結構式分別為：(VO²⁺)_m-(γ-PGA)，其中，m是介于2500～6000的正整數，和其分子量介于1000kD～2000kD。

該復合物的優點是生物利用度高、活性強、毒副作用小。

本發明要解決的第二個技術問題是提供VO-γ-PGA復合物的制備方法。

本發明解決上述技術問題的方案是：利用市售的菌種進行γ-PGA的發酵并對其進行分離純化，將γ-PGA與VOSO₄進行修飾反應，得到VO-γ-PGA復合物粗品，再經離心、真空干燥得到VO-γ-PGA復合物。

現詳細說明本發明的技術方案。該復合物的制備方法，其特征在于，具體操作步驟：

第一步γ-PGA-Na的制備

將購于中國微生物菌種保藏中心的B.Subtils.sp活化后按3％～7％的接種量接入LB液體培養基，每升LB液體培養基中加入麥芽糖30g～70g，酵母膏5g～15g，谷氨酸鈉10g～50g，NaCl?5g～15g，KH₂PO₄1g～9g，MgSO₄·7H₂O?0.1g～0.9g，培養基的pH值為5.0～7.0，20℃～50℃下搖瓶發酵24h～72h，得發酵液，發酵液加蒸餾水稀釋1～7倍，8000r/min～15000r/min離心10min～20min去菌體，將無水乙醇加入上清液中，上清液與無水乙醇的體積比為1∶1～5，攪拌得沉淀，真空干燥，得γ-PGA-Na粗品，該粗品溶于蒸餾水，濃度為0.5％～1.5％，以蒸餾水為透析液透析，過濾，得濾液，濾液冷凍干燥，得γ-PGA-Na，其分子量介于1000kD～2000kD，每升培養基制得γ-PGA-Na20.0g～30.26g；

第二步VO-γ-PGA復合物的制備